Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f — English translation – Linguee

Содержание

Соседи по дому познакомились и начали встречаться благодаря коронавирусу: Люди: Из жизни: Lenta.ru

Соседи по дому из американского города Чикаго, штат Иллинойс, начали встречаться благодаря пандемии коронавируса. Об этом сообщает издание People.

Алекс Мортон (Alex Morton) и Стейси Павлицки (Stacie Pawlicki) жили в одном многоквартирном доме с сентября 2019 года, но начали общаться благодаря пандемии коронавируса. «Я ждала курьерскую доставку из IKEA, около лифта. В это время из соседней квартиры вышел мужчина и поздоровался со мной. Я посмотрела на него и с удивлением подумала, как он красив. Тогда мне сразу захотелось побыстрее сбежать, так как я была не накрашена», — рассказала Павлицки.

33-летний Мортон затеял с соседкой разговор, но вскоре приехал курьер и прервал их беседу. Новый знакомый предложил Павлицки помочь с установкой мебели. «Тогда встречалась с другим человеком и не понимала, расценивать ли наше общение как флирт, или это просто добрый жест со стороны соседа», — отметила американка.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee

После этого пара несколько раз случайно встречалась в лифте, и их краткие беседы постепенно переросли во что-то большее. 20 марта 2020 года в штате ввели режим ограничений из-за пандемии, и Павлицки встретила Мортона, который собирался на пробежку. Она пригласила его в гости, и мужчина согласился.

Со временем они познакомились ближе, и к июлю решили съехаться. «Год назад я бы не подумала, что мир станет закрытым, и благодаря этому я найду любовь. И это будет парень, живущий по соседству», — подчеркнула Павлицки.

Пара надеется, что с распространением вакцины они смогут вместе путешествовать, ходить на концерты и в кино, посещать свадьбы друзей и исследовать город.

Ранее сообщалось, что пенсионеры из английского города Прествич, графство Большой Манчестер, осознали, что любят друг друга, и решили съехаться из-за пандемии коронавируса. Пара вместе поет песни военных лет, чтобы развлечь себя во время карантина.

Только веселье и позитив — в «Ленте Lite» в Telegram

Государственный секретарь Союзного государства России и Белоруссии познакомился с разработками РКС для цифровой экономики

Государственный секретарь Союзного государства России и Белоруссии Дмитрий МЕЗЕНЦЕВ познакомился с новейшими российскими разработками и технологиями в области космического приборостроения, дистанционного зондирования Земли (ДЗЗ), спутниковой связи, навигации и внедрения результатов космической деятельности в экономику в ходе посещения Научного центра оперативного мониторинга Земли АО «Российские космические системы» (РКС, входит в Госкорпорацию «РОСКОСМОС»).Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee

Наработки РКС в сфере инфраструктурных решений для цифровой экономики могут быть адаптированы и интегрированы для нужд социально-экономического развития Союзного государства России и Белоруссии.

Геоинформационные системы на основе российских технологий космической навигации и дистанционного зондирования Земли для повышения эффективности управления транспортной системой, строительством и сельским хозяйством были представлены Дмитрию МЕЗЕНЦЕВУ во время визита в РКС. Государственного секретаря Союзного государства России и Белоруссии сопровождал генеральный директор РКС Андрей ТЮЛИН.

Дмитрию МЕЗЕНЦЕВУ продемонстрировали программное обеспечение и возможности по обработке получаемых из космоса данных, а также самые современные разработки РКС в области создания приборов для спутников дистанционного зондирования Земли. Возможности этих систем позволяют отслеживать состояние атмосферы, мирового океана, контролировать развитие масштабных климатических изменений, получать данные о фертильности почв, состоянии флоры, вести геологические исследования и выявлять мельчайшие очаги пожаров и прогнозировать паводковую ситуацию.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee

Государственный секретарь Союзного государства оценил современные решения для развития цифровой экономики – систему учета и контроля земельных и лесных ресурсов, возможности высокоточной навигации в области строительства, системы мониторинга объектов инфраструктуры и транспорта, которые могут быть адаптированы и интегрированы в систему цифрового управления экономикой Союзного государства. Решения на основе данных, получаемых космическими аппаратами, позволяют создать геоинформационную основу для создания различных сервисов в рамках развития цифровой экономики.

 С 2012 года на взаимовыгодной основе осуществляется обмен данными дистанционного зондирования Земли, получаемыми космическими аппаратами «Канопус-В» и белорусским космическим аппаратом для информационного обеспечения потребителей Российской Федерации и Республики Беларусь. Сегодня ведется создание совместной российско-белорусской космической системы ДЗЗ.

РКС в 2021 году отмечает 75-летний юбилей. Отсчет своей истории компания ведет со дня основания Научно-исследовательского института 885 (НИИ-885, сегодня – АО «Российские космические системы», РКС), который был создан постановлением Совета министров СССР №1017-419 от 13 мая 1946 года.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee Это событие положило начало становлению и развитию космического приборостроения России. НИИ-885 – одна из организаций, заложивших основу всей отечественной ракетно-космической промышленности. За годы развития РКС принимал участие во всех ключевых отечественных космических проектах и программах. Без аппаратуры, созданной компаниями холдинга, невозможно представить многие космические достижения и успехи, к которым применимо выражение «впервые в мире».

Костромской губернатор познакомился с новой технологией производства, применяемой на нашем заводе

Ситникову Сергею Константиновичу во время очередного посещения АО “КСМЗ”  представили первую модель катера, построенную по новой технологии – модульному принципу.  

Суть данной технологии в том, что каждая часть катера (рубка, модуль, машинное отделение) строится отдельно, а затем катер собирается из этих частей подобно детскому конструктору, только уже в иных масштабах. Таким образом, клиент может выбрать блок с нужным ему количеством двигателей и типом движителей, модуль (грузовой, пассажирский, для ликвидации аварийных разливов нефти, водолазный, представительский и т.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee д.) и рубку (укороченную или удлиненную, в зависимости от того, сколько нужно спальных мест и свободного пространства). А мы уже собираем готовый катер из выбранных клиентом блоков, также готовы оказать любую консультативную помощь при выборе блоков.

Губернатор оценил условия труда, созданные для работников на заводе, а также отметил важность перехода предприятия на импортонезависимость: «Условия труда созданы для людей, вентиляция вся сделана, оборудование новое закуплено. Ну и, наверное, самый большой плюс предприятия заключается в том, что наличие собственного КБ позволяет выпускать в серию новые абсолютно изделия, и под заказы силовых структур дорабатывать те изделия, которые проектировались раньше. Предприятие в этом плане очень гибкое. Ну и плюс, конечно, предприятие производит всё на отечественном продукте. Это очень хорошо». (Источник: www.gtrk-kostroma.ru).

Председатель совета директоров АО “КСМЗ” Смирнов Андрей Валерьевич также рассказал главе региона про перспективы увеличения производственных мощностей.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee На данный момент на территории завода происходит закладка фундамента под еще одну производственную площадку.

По итогам встречи губернатор высоко оценил работу нашего предприятия. Мы, со своей стороны, благодарны Сергею Константиновичу за то, что весной этого года, в период национального локдауна и противоэпидемиологических мероприятий, он принял решение не ограничивать деятельность предприятий, выполняющих гособоронзаказ и заказы для государственных и муниципальных нужд, что позволило нашему заводу эффективно работать в кризисной ситуации, развиваясь и наращивая объемы производства.

Чёрный апрель восемьдесят шестого…

Как только случилась авария на Чернобыльской АЭС, Иван Силин из Малоархангельского района сразу записался в ряды добровольцев, чтобы спасать людей.

Иван Силин родился и вырос в д. Первая Подгородняя Малоархангельского района. Окончив школу, поступил в местное училище на водителя. Затем по призыву в армию Силин два года отслужил в Дальневосточном военном округе в Хабаровске.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee

Вернувшись после службы домой, Иван Силин устроился на работу водителем автобуса. Трудился на междугородных и местных маршрутах. Кстати, на работе Иван познакомился и со своей будущей супругой Натальей - она была пассажиркой в его автобусе.

Жизнь шла своим чередом, в январе 1984 года в семье Силиных родилась дочь Марина. Иван Александрович продолжал работать в автотранспортном предприятии Малоархангельского района.

- 1986 год, когда случилась авария, я запомнил на всю жизнь, - рассказывает Иван Александрович. - Как только объявили набор добровольцев в Чернобыль, я посоветовался с женой и решил записаться. Нужно было помогать попавшим в беду людям. Помню, поехали с ребятами на призывной пункт в Орёл, потом в Курск, оттуда на поезде в Киев, а из Киева нас привезли под город Иванков - в 30 километрах от Чернобыльской АЭС. Мы убирали радиоактивный грунт, вывозили его за территорию станции, укладывали бетонные плиты вместо заражённого грунта вокруг станции и на её территории.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee

Иван Силин пробыл в опасной зоне около месяца. Как только добровольцы набирали 25 рентген облучения, их сразу отправляли обратно домой. Обследования проходили постоянно.

- Мы жили в полевом лагере в палатках, - продолжает рассказ Иван Александрович. - Строили зимний лагерь для тех, кто приедет после нас. Запомнилось то, что люди туда прибывали со всего Союза, всем миром боролись с этой катастрофой. Осознание всего ужаса произошедшего пришло позже. Порой вспоминаешь ребят… так мало нас осталось. В нашем районе, например, всего девять чернобыльцев, а было значительно больше. Работая на Чернобыльской АЭС, я подружился с ребятами из соседних районов Орловской области. С Николаем Савенковым из Колпны общаемся до сих пор.

После возвращения домой Иван Силин решил сменить сферу деятельности - пошёл работать в 26-ю пожарно-спасательную часть Малоархангельского района. В пожарной охране он уже 34 года.

- Наш караул - как одна семья, - говорит Иван Александрович.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee  - Иначе нельзя: люди, готовые в любую минуту прийти на помощь, рисковать собой, должны быть полностью уверены в своих товарищах.

Иван Силин - человек с активной гражданской и жизненной позицией. Сейчас он руководит общественной организацией Союз «Чернобыль» Малоархангельского района.

Мальчик, мечтающий спасать людей, познакомился с работой спасателей

      Никита показывает высокие результаты в учебе, занимается спортом и является стипендиатом АНО «Поколение победителей». Его главная мечта – стать спасателем, для этого он планирует поступить в пожарно-спасательный колледж им. Героя России В. М. Максимчука.

     «Когда я узнал о работе пожарных и спасателей, твердо решил для себя, что хочу, как и они, помогать людям. Знаю, что это опасная работа, но готов к сложностям. Я мечтал встретиться с профессионалами и побывать в спасательном отряде», — рассказал мальчик.

       Специалисты Пожарно-спасательного центра Москвы провели для гостя настоящую боевую тренировку, в ходе которой Никита стал частью команды Аварийно-спасательного отряда № 9.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee Вначале Никиту переодели в боевую одежду, рассказали о специальной технике и оборудовании, применяемых на пожарах и чрезвычайных ситуациях для спасения людей. Затем Никита попробовал перекусить арматуру при помощи гидравлического инструмента. Далее ему предстояло пройти маршрут в темлодымокамере в составе звена газодымозащитной службы, где, как и на реальном пожаре, в условиях плохой видимости мальчик и спасатели передвигались по узким проходам лабиринта и преодолевали различные препятствия. Особый интерес у будущего спасателя вызвала работа на специальном тренировочном комплексе, где Никита со своими наставниками с помощью альпинистского снаряжения спускался с высоты и оказывал помощь условному пострадавшему. Благодаря проведенному инструктажу и целеустремленности, мальчик успешно справился с заданием.

     «В нашем подразделении всегда рады обучить начинающего специалиста, а также поддержать человека, выбравшего путь спасателя, – рассказывает Сергей Кудра, начальник аварийно- спасательного отряда № 9 ГКУ «ПСЦ».Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – LingueeМы с коллегами заметили, что у Никиты горят глаза, есть желание учиться и у него уже сейчас получается выполнять упражнения, разработанные для обучения спасателей. Сегодня Никита узнал о работе наших специалистов из первых уст и, надеюсь, не изменит решения относительно будущей профессии. Мы будем рады, если после учебы он придет к нам работать».

      По завершению занятий Никита обменялся контактами с сотрудниками отряда и договорился об ответном визите спасателей в Центр содействия семейному воспитанию, где он живет.

      Проект «Давай дружить» Департамента труда и социальной защиты населения города Москвы стартовал два месяца назад, он направлен на профориентацию молодежи и общение с профессионалами столицы. В ходе встреч подростки знакомятся с интересными людьми, расширяют жизненный кругозор и получают новые знания и опыт.

ИГУ   -  новости

К первому сентября для своих первокурсников Иркутский государственный университет провел квест-знакомство с вузом и некоторыми его информационными ресурсами.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee

Для проведения квеста университет выбрал свою официальную платформу в социальной сети Вконтакте. Здесь, в группе ИГУ, на которую абитуриенты подписывались еще на стадии подачи заявлений и документов на поступление, публиковались задания и принимались ответы. Задания, а всего их было пять, публиковались каждые полтора часа, что только добавляло азарта.

— Квест очень интересный, я все задания ждала с нетерпением. Сам по себе он не был сложным, сразу после прочтения задания мне было ясно — где искать разгадку. Тем не менее, на одном из вопросов я даже успела запаниковать, но, к счастью, быстро сообразила, про что идет речь, — говорит первокурсница ИГУ Екатерина Черных.

Участники искали кодовые слова, из которых должна была сложиться фраза: «Каждый студент должен: быть смелым, любознательным, мыслить критически, любить альма-матер». И поиск этот был не совсем простым. Во-первых, нужно догадаться, где искать код. Во-вторых, выполнить задание.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee В-третьих, найти нужные слова, запомнить или записать их.

— Тест был непростой, так как я только начинаю входить во всю эту тему, но интересный. Понравилось, что квест прошел в интернете, и не пришлось бегать по городу, а благодаря тому, что он состоял всего из пяти вопросов, мне удалось запомнить все прочитанные факты, — сказала одна из победительниц Дарья Ситникова.

Разбирая задания и выискивая ответы, участники познакомились и научились пользоваться сайтом ИГУ и популярным порталом Ирк.ру, нашли и взяли на заметку данные из специально разработанного путеводителя первокурсника, узнали, что у университета имеются публичные страницы в социальных сетях и услышали, возможно и впервые, студенческий гимн Гаудеамус.

— Все прошло интересно и без лишней нервозности. Хорошо, что к соревновательному элементу добавилась еще и информативная составляющая. По крайней мере, я узнала новое об университете, и это я считаю действительно важным, — отметила первокурсница Педагогического института ИГУ Эльвира Галенская.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee

Как и чем живут люди с инвалидностью в Башкирии? Истории сильных духом людей - Новости - Уфа

Миннислам Вахитов возглавляет Салаватскую районную организацию инвалидов. Он прибыл в Уфу на республиканские соревнования по бильярду среди людей с ограниченными возможностями здоровья. В юном возрасте мужчина не подозревал, что когда-нибудь окажется в инвалидной коляске. Однако в восьмидесятых произошла трагедия, которая перевернула его жизнь.

 

Миннислам Вахитов, председатель Салаватской районной организации инвалидов: «Я ехал на мотоцикле, меня сбила машина. Это частая ситуация, когда мужчины становятся инвалидами. С 1981 года я сижу в инвалидной коляске, в этом году будет уже 40 лет. Первый год, наверное, только лежал, а потом начал ездить на коляске, познакомился с другими инвалидами.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee Они мне сказали, что нужно быть поактивней».

 

В 1994 году Миннислам создал общество инвалидов в Салавате и собрал команду единомышленников, с которыми начал ездить на соревнования разных масштабов. Несмотря на ограниченные возможности здоровья, члены общества занимаются спортивным, водным туризмом, пауэрлифтингом, теннисом и другими видами спорта.

 

Миннислам Вахитов, председатель Салаватской районной организации инвалидов: «Не хочется сидеть дома. Сейчас у меня много друзей, причем не только по Башкирии, но и по всей России. Хочется чаще с ними видеться. У нас же в Салаватском районе проводятся соревнования по спортивному туризму, со всей страны там собираются люди. Там мы и познакомились, и оттуда все друг друга знают».

 

Однако любовь к активному образу жизни не только дает возможность инвалидам найти друзей и товарищей, но и даже обрести вторую половинку. Так случилось с Валентиной Мухаматьяновой и Сергеем Арефьевым из Кандров.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee Пара познакомилась 18 лет назад на спартакиаде в Кумертау.

 

« - Я приехала туда в первый раз, и сразу завоевала 2 медали по тяжелой атлетике и армрестлингу.

- Положительная женщина, вот и понравилась мне.

- Конечно, столько медалей завоевала!»

 

 

Валентина Мухаматьянова: «Я переболела полиомиелитом в детстве, мне не делали прививку, потому что росла в деревне. Мне сейчас 66 лет, 64 из которых я на одной ноге».

 

Сергей Арефьев: «В 33 я получил травму. Ночью на мотоцикле ехал, и попал под машину».

 

У Валентины и Сергея свой магазин одежды. Несмотря на трудности с ногами, пара постоянно путешествует и занимается спортом.

 

Валентина Мухаматьянова: «Вообще, я счастливый человек. У меня есть семья, трое детей, я абсолютный чемпион Башкирии по тяжелой атлетике. Играю в бильярд, теннис.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee Имея инвалидность, много общаюсь, и чувствую себя как-то не так. У меня около 20 кубков персональных и почти 80 же медалей».

 

 

Сергей Арефьев: «Мне было 8 лет, когда мой отец попал под поезд и лишился левой ноги. Он ходил на протезе. Нас, троих сыновей, поднял и построил дом. У меня был пример не сдаваться. Я и не сдался».

 

Еще одной участницей соревнований по бильярду стала Эльза Янабаева. Несколько лет назад женщина попала в ДТП, после чего оказалась в инвалидной коляске. Однако это не помешало ей стать профессиональной спортсменкой.

 

Эльза Янабаева, председатель Чишминской региональной организации Всероссийского общества инвалидов: «В Уфе у нас проходил чемпионат России по фехтованию в центре Риммы Баталовой, он проводился среди паралимпийцев. Я долго к этому шла, в течение 10 лет, и в итоге в этом году я заняла первое место на рапире в категории С».Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee

 

Эльза говорит, что не упасть духом ей помогли близкие и активный образ жизни. Женщина заверила, что инвалидность не мешает ей жить.

 

Эльза Янабаева, председатель Чишминской региональной организации Всероссийского общества инвалидов: «Нисколько не мешает. Это все в голове. Если сам себе будешь говорить: «Я не могу, я не справлюсь», то так и будет, а если будешь вести себя, как все, как здоровый, то все получится. Не нужно себя ограничивать, все ограничения в голове».

 

Подобные соревнования по бильярду и другим видам спорта для многих людей с ограниченными возможностями здоровья — это не только шанс проявить себя, но и возможность увидеться с друзьями, пообщаться и постараться помочь друг другу найти уверенность в себе, благодаря которой открываются совсем не ограниченные возможности.

Его собственными словами: Джейкоб Лоуренс в Метрополитене и МоМА

Закрытые с марта из-за пандемии коронавируса, Музей современного искусства и Музей искусств Метрополитен вновь открываются с ограниченным количеством посетителей, различными предупреждениями о масках и социальном дистанцировании, а также несколько новых выставок, среди них «Джейкоб Лоуренс: американская борьба».Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee Эта выставка в Метрополитене объединяет панели менее известной серии , которые легендарный модернист нарисовал в середине 1950-х годов, исследуя темы от американской революции до западной экспансии.

Лоуренс был частым посетителем обоих музеев. В интервью 1996 года, на которое ссылается нынешняя выставка, он сказал Майклу Киммельману, тогдашнему главному критику The New York Times, что его любимая работа в европейских картинных галереях Метрополитена - «Путешествие волхвов» раннего итальянца. Художник эпохи Возрождения Сассетта.

Далее следует отредактированная, сокращенная, обновленная версия этого интервью.

Джейкоб Лоуренс умер в 2000 году в возрасте 82 лет.Четыре года назад для серии Times, переосмысленной и переросшей в книгу под названием «Портреты», я провел день, сопровождая его по Музею современного искусства и Метрополитену. Тогда он ходил с трудом и иногда выбирал инвалидное кресло, которое на всякий случай взяла с собой его жена, художница Гвендолин Найт.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee Мы втроем смотрели на все, что его интересовало, от скульптур догонов до Дюбюффе. Лоуренс был медвежьим, скромным, учтивым и милым человеком. «Думаю, в отрицательном заявлении нет ничего плохого», - успокоил он себя в какой-то момент, прежде чем набраться храбрости, чтобы отпустить Джексона Поллока.

Найт и Лоуренс давно переехали в Сиэтл из Нью-Йорка. Но «Модерн» и «Метрополитен», сказал он мне, по-прежнему чувствовали себя как дома. Будучи подростком в 1930-х годах, он ходил по 50 с лишним кварталов от своей квартиры в Гарлеме, чтобы изучать картины раннего итальянского Возрождения в Метрополитене. А в 1941 году серия Лоуренса «Миграция» о Великой миграции афроамериканцев с Юга после Первой мировой войны, которая привела его семью к северу, была приобретена и разделена между MoMA и Коллекциями Филлипса в Вашингтоне.В то время ему было 24 года.

Следующее интервью, проведенное почти 25 лет назад, показывает, что Лоуренс - человек своего поколения, продукт Гарлемского Возрождения и художник-историк, чье искусство остается актуальным, как никогда.Познакомился и: %d0%bf%d0%be%d0%b7%d0%bd%d0%b0%d0%ba%d0%be%d0%bc%d0%b8%d0%bb%d1%81%d1%8f - English translation – Linguee В 40-50-е годы, когда в мире искусства линии противостояния разошлись между абстракционистами и соцреалистами, он избрал средний путь. В 60-е годы, когда черные художники были более воинственными, чем он, как он говорил, его искусство недостаточно радикально, он придерживался своего курса. «Возможно, мне повезло, что я не мыслил интеллектуальными или идеологическими терминами», - сказал он мне в какой-то момент.«Меня никогда не увлекал какой-то определенный художественный круг. Это мой темперамент ».

Музей современного искусства

Такси высадило Лоуренса и Найта на 53-й улице, и мы втроем пошли посмотреть мексиканских художников-монументалистов в MoMA. По его словам, Лоуренс вырос, изучая политически ангажированных американских художников, таких как Антон Рефрегер, Бен Шан, Уильям Гроппер и Филип Эвергуд, и он часто ходил посмотреть на «Гернику» Пикассо, которую тогда выставляли на обозрение в Модерне.

Но именно мексиканцы - Диего Ривера, Давид Альфаро Сикейрос и Хосе Клементе Ороско - по его словам, оказали огромное влияние на его собственное развитие.В музее он рассказывал о «Сапатистах» Ороско и, в нескольких галереях, о росписи Сапаты Риверы.

«Хорошая картина», - сказал он о Ривере. «Но когда вы смотрите на Orozco, кажется, что в каждом мазке этой работы есть энергия, которой я не нахожу в Rivera. Вы осознаете мастерство и контроль Риверы. Вы смотрите на его объект ".

Что касается Ороско: «Я часто использовал эту работу, чтобы научить динамике композиции и ценности социального содержания, страстно выраженного.Это очень похоже на то, что я думаю о состоянии человека. У мексиканских художников-монументалистов было как содержание, так и форма - социальное содержание и абстрактная форма - и он был лучшим из мексиканцев ».

Затем Лоуренс вспомнил о встрече с Ороско в 1940 году. В то время Ороско писал фреску под названием «Пикирующий бомбардировщик». «Меня учили, что вы делаете небольшую версию того, как будет выглядеть работа, ну, знаете, исследование», - сказал Лоуренс. «Но Ороско достал кусок картона, вроде тех, что продаются с мужскими рубашками из прачечной.И на нем было всего несколько расплывчатых куриных царапин. Это было его исследование для работы. Он сказал мне: «Это все, что мне нужно».

«Это был урок, который он мне преподал. Дело в том, что он был очень спонтанным, очень прямым. Что еще более невероятно, потому что с фреской, если вы допустили ошибку, вам придется выкопать штукатурку и начать все сначала ».

Лоуренс тоже хотел увидеть комнату Поллока. Когда в 1950-х годах мир искусства Нью-Йорка встал на сторону Поллока и других абстрактных экспрессионистов, Лоуренс вышел из моды.Теперь, глядя на Поллока, он сказал:

«Есть определенные образные работы, которые я могу сказать, что считаю ужасными, и я просто не хочу на них смотреть. Я не хочу на них смотреть, потому что я сильно к ним отношусь - я отношусь к ним серьезно, потому что они значимы для меня.

«Но я не мог сказать этого о Поллоке. Это не так актуально ".

Метрополитен-музей

В Метрополитен Лоуренс рассказал о группе молодых чернокожих художников, в том числе и о Найте, которые регулярно вместе ходили в музей и обходили передовые галереи, такие как «Американское место Альфреда Штиглица».«Тогда вы чувствовали то же самое, заходя в каждое художественное учреждение или галерею», - сказал он. «Это не было гостеприимно, но никто не хотел вас удерживать. Затем мы отправлялись в Horn & Hardart’s и спорили о том, что видели ».

Что ему запомнилось? «Картины Джона Марина были открытием», - сказал он. «Также картины Артура Дава». Он добавил комиксы Katzenjammer Kids и Jiggs and Maggie (также известную как Bringing Up Father) и фильмы, которые оказали влияние. «Мне было интересно рассказывать истории.Когда я был молодым художником, я, естественно, не получал больших заказов на росписи, поэтому я думал, что рассказать историю жизни человека был с помощью серии панелей, вроде комиксов, я полагаю.

«Было очень важно, чтобы сообщество в Гарлеме поддерживало меня и оставило меня в покое, чтобы найти свой собственный путь. Меня могли толкнуть в другом направлении. Люди могли бы сказать: «Это не способ делать это» или «Руки непропорциональны». Я использовал краску для плакатов, водную среду, а не масла.И я использовала яичную темпера, потому что мне понравилась ее полупрозрачность; им было легко пользоваться. Кроме того, я мог купить банку на десять центов. Никто меня от этого не уводил. Люди уважали предметы, которыми я занимался, например, Харриет Табман, Джон Браун. И они также оценили то, что, по их мнению, было определенной наивностью. Они сказали: «Он производит что-то ценное, хотя на самом деле не знает, что делает» ».

Я помню, как Лоуренс смеялся.

Мы начали в Метрополитене, глядя в тишине на «Путешествие волхвов» Сассетты, сиенского художника 15 века.

«Я не могу придумать лучшего термина для описания эффекта, чем магия», - решил Лоуренс. «Он упрощен, но в то же время очень сложен. Мы говорим о простоте и подразумеваем, что этого легко достичь. Это непросто. Я не хочу говорить об этом слишком профессорски. Конечно, я могу описать эти формы, то, как они уравновешивают друг друга, как изображение перемещается от темного к светлому. Но есть кое-что еще, что я не могу описать формально, это определенное чувство, интуитивность, эмоциональная достоверность.А может быть, это потому, что художник не был зациклен на риторике - понимаете, разговорами, школьными разговорами, педантикой.

«У меня не было лет формального обучения. Может, это было удачей. Я был потрясен своим городским опытом, когда я прибыл в Нью-Йорк [из приемной семьи в Филадельфии, чтобы воссоединиться с его матерью] в 13 лет, в 1930 году, и впервые увидел ритм и геометрию пожарных лестниц, окон , многоквартирные дома.

«Иногда я смотрю на свои работы в 1930-х годах и думаю, что вот как я хочу писать сейчас.Но, конечно, ты не можешь вернуться ».

Перед итальянским портретом мастера замка Кастелло середины 15 века, изображающим женщину с длинной шеей в профиль и волосы в жемчужной сетке, он сказал: «Это стереотип. Я мыслю этническими категориями, с этой длинной шеей и изящной головой. Как будто художник на самом деле не наблюдал за ней. Всегда есть определенные характеристики, относящиеся к расе и так далее, и когда вы рисуете кого-то, вы можете думать, что видите их, но на самом деле вы рисуете эти черты.Это как в поговорке - что это было? - менестрели были белыми, копировавшими черных, которые копировали белых, копируя черных, или что-то в этом роде.

В американском крыле Лоуренс остановился перед картиной Альберта Пинкам Райдера «Трудящиеся моря», изображающей парусник под полной луной. «Тайна этого чудесна», - сказал он. «Это больше не луна, это форма, которая принимает другие формы. И эта форма здесь, лодка, похожа на рот. Все нестабильно, упрощенно, без загромождений. А поскольку оно уменьшается, становится как-то больше.Чем больше вы уменьшаете что-то, тем больше оно становится многообещающим и динамичным ».

«Это одна из величайших великих работ», - сказал Лоуренс. «Вы видите черных как реальных людей, отвечающих человеку, который пытается улучшить их жизнь. Посмотрите на эти лица, на эту мать, держащую своего ребенка, которая хочет, чтобы ребенок соприкоснулся с этим человеком, а этот человек соприкоснулся с ее ребенком ».

На выходе Лоуренс, который к этому моменту уселся в инвалидном кресле, попросил у охранника дорогу.Охранник указал дорогу, затем протянул руку.

«Я просто хочу сказать вам, насколько важна ваша работа и как много она значит для меня», - сказал он. Лоуренс широко улыбнулся, поблагодарил охранника и поднялся со стула, чтобы пожать охраннику руку.


Джейкоб Лоуренс: Американская борьба

До 1 ноября в Художественном музее Метрополитен, который откроется 29 августа (дни предварительного просмотра участников - 27 и 28 августа). Посетите metmuseum.org, чтобы ознакомиться с обзором протоколы безопасности и информация о билетах.

MET и ваша финансовая помощь

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ MET

Michigan Education Trust (MET) - это программа предоплаты за обучение, которая оплачивает только обучение и обязательную плату. Если вы ожидаете, что ваше обучение будет оплачиваться из MET, вы должны уведомить MET по телефону 1-800-638-4543. Затем MET отправит CMU список студентов, посещающих данный семестр. Плата за обучение будет снята со счета студента, но вскоре после этого через систему выставления счетов третьей стороной CMU будет применен противоположный кредит НДПИ. CMU выставит счет на НДПИ за обучение через наших сторонних сотрудников по выставлению счетов в Службе студенческих счетов и университетской биллинговой службе (SASUB).Если у вас есть вопросы, с SASUB можно связаться напрямую по телефону 989-774-7340.

MET и FAFSA

В связи с изменениями, внесенными в Закон о возможностях высшего образования 2008 года, 529 предоплаченных планов обучения и 529 сберегательных планов рассматриваются как инвестиции в Бесплатном заявлении на федеральную помощь студентам (FAFSA). Для учащегося, который должен сообщить информацию о своих родителях, счета указываются как вложения родителей в вопросе FAFSA Step 4: «Какова на сегодняшний день чистая стоимость вложений ваших родителей».Включите все учетные записи, принадлежащие учащемуся, и все учетные записи, принадлежащие родителям для любого члена семьи. Однако для учащегося, который не сообщает информацию о своих родителях, счета, принадлежащие учащемуся (и его супруге), указываются как вложения учащихся в вопросе Шага 2 FAFSA: «Каковы на сегодняшний день ваши (и вашего супруга) вложения? , в том числе недвижимость? ».

При завершении FAFSA текущего года стоимость квалифицированного пособия на образование, которое должно быть отражено как инвестиции, может быть определена следующим образом:

  • Для программ с предоплатой обучения (например,грамм. НДПИ), стоимость возмещения любых кредитов за обучение или сертификатов, приобретенных в рамках квалифицированного пособия на образование; и
  • Для сберегательных планов (например, MESP) или сберегательных счетов - текущий баланс счета.

Дополнительную информацию о МЕТЕ можно получить по адресу http://www.michigan.gov/setwithmet или по бесплатному телефону (800) 638-4543.

МЕТ для аспирантов

Аспиранты могут использовать свои кредиты МЕТ. Однако средства будут применяться по ставке бакалавриата.Студент несет ответственность за разницу в стоимости обучения сверх стоимости бакалавриата.


Удовлетворенные и неудовлетворенные потребности бездомных на разных этапах реинтеграции жилья: исследование с использованием смешанных методов

Характеристики выборки и сравнения групп

В общей сложности 46 пользователей временного жилья, 242 жильца временного жилья и 208 постоянных жителей жилья (N = 497) были приглашены для участия в исследовании, и 455 человек приняли участие, что составило 92% ответов.Они составляли 45/46 (98%) пользователей временного жилья, 229/242 (94%) жителей временного жилья и 181/208 (87%) жителей постоянного жилья. В то время как большинство участников были мужчинами, значительно меньше мужчин было в группе постоянного жилья по сравнению с временным жилищем или аварийными приютами. Средний возраст участников составлял 48 лет (стандартное отклонение: 11,2). Большинство (86%) родились в Канаде, и среди них значительно больше жителей Канады, пользующихся услугами временного жилья, чем жителей постоянного или временного жилья.Почти все (94%) были одинокими, что значительно больше среди лиц, проживающих во временном жилье, чем среди постоянных жителей. По сравнению с жителями постоянного жилья, временные жильцы сообщали о значительно большем количестве SUD или финансовых проблем, связанных с потерей жилья. Хроническую бездомность испытали 48%, больше среди жителей постоянного жилья (56%), чем среди лиц, проживающих во временном жилье (43%) или пользователей временного жилья (36%). Что касается использования медицинских услуг, у 51% был семейный врач, а у 44% - куратор.У значительно большего числа жителей постоянного жилья был семейный врач или куратор, чем у жителей других групп. Пользователи аварийных приютов значительно чаще использовали отделения неотложной помощи, чем жители постоянного или временного жилья. Жители постоянного жилья также были значительно реже госпитализированы, чем пользователи временного жилья и лица, проживающие во временном жилье. В целом, 72% участников были диагностированы с МГП, 39% с ССД и 36% с сопутствующей МГП / ССД; 28% имели хронические соматические заболевания, а 49% - острые соматические заболевания.Значительно меньше жителей постоянного жилья сообщили о SUD или общих физических заболеваниях, чем пользователи временного жилья или лица, проживающие во временном жилье. Жители постоянного жилья также имели значительно меньшее количество сопутствующих MHD-SUD и общих физических заболеваний, чем жители временного жилья (Таблица 1).

Обзор заявленных потребностей по категориям.

В таблице 2 представлена ​​сводная статистика по пяти категориям потребностей. Чаще всего сообщалось об основных потребностях (86%), за ними следовали потребности, связанные со здоровьем и социальными услугами (78%), безопасностью (66%), любовью и сопричастностью (30%) и самооценкой или самоактуализацией (20%). .Неудовлетворенные потребности были выше удовлетворенных потребностей в отношении безопасности (43%), в то время как удовлетворенные и неудовлетворенные потребности были почти равны по основным потребностям (59% и 57% соответственно). Удовлетворенные потребности были выше неудовлетворенных потребностей в трех оставшихся категориях (57% против 38% для здравоохранения и социальных услуг; 20% против 11% для любви и принадлежности; 8% против 2% для самооценки и самореализации).

Процент заявленных потребностей по категориям пользователей временного жилья, лиц, проживающих во временном жилье, и жителей постоянного жилья.

В таблице 3 представлены результаты по пяти категориям общих потребностей, а также удовлетворенных и неудовлетворенных потребностей по трем жилищным условиям. Три из пяти категорий также включали подкатегории. Что касается процентного соотношения участников, сообщающих о потребностях, между тремя группами не выявлено значительных различий. Сравнение общих удовлетворенных и неудовлетворенных потребностей также было одинаковым для пользователей временного жилья, лиц, проживающих во временном жилье, и жителей постоянного жилья. Единственное существенное различие между тремя затронутыми группами: общие удовлетворенные и неудовлетворенные основные потребности ( X 2 = 7.2; p = 0,02), где общие удовлетворенные потребности были выше неудовлетворенных потребностей жителей постоянного жилья (65% против 48%) и пользователей временного жилья (60% против 56%), тогда как общие неудовлетворенные потребности были выше, чем удовлетворенные потребности в жильцы временного жилья (60% против 56%).

Участник комментирует потребности трех групп жилья.

Что касается базовых потребностей, неудовлетворенные первичные потребности выживания в основном описывают чувство незащищенности в отношении достаточности продовольствия, сна и жилья в краткосрочной и среднесрочной перспективе (см. Приложение S2 для иллюстративных цитат).Некоторые пользователи убежищ (около 20%) сожалели об опасных условиях на улицах, ограниченном количестве мест в убежищах, проблемах с клопами и необходимости уезжать утром. Жители временного жилья выражали меньше стресса, связанного с жильем, зная, что они находятся в безопасности в течение определенного фиксированного периода времени. Тем не менее, около половины из них были обеспокоены своим долгосрочным положением и отсутствием свободных мест в постоянном жилье, что привело к длительному времени ожидания. Жители постоянного жилья выражали большее чувство стабильности с точки зрения своей способности удовлетворять повседневные потребности и меньше беспокоились о будущем.Однако около 30% пользователей были обеспокоены своими жилищными условиями, поскольку многие единицы жилья нуждались в срочном ремонте. Поскольку почти все получали социальную помощь в качестве основного источника дохода, они часто были вынуждены полагаться на продовольственные банки после оплаты аренды. Чаще всего они ссылались на удовлетворение потребностей в жилье (около 65%), тогда как две другие группы говорили больше о неудовлетворенных потребностях (около 60% и 55% соответственно). Большинство из них наслаждались чувством свободы, имея собственное жилье, несмотря на плохие условия.

Что касается потребностей в доступе к медицинским и социальным услугам, участники всех групп сообщили о хорошем опыте работы с поставщиками, которые предлагали информацию и связывали их с услугами. К неудовлетворенным потребностям относятся: проблемы с доступом к специализированным службам охраны здоровья и наркозависимости или службам на уровне общины, а также долгое ожидание лечения из-за нехватки персонала, невозможность доступа к профессиональным услугам, не покрываемым медицинским страхованием, и отсутствие индивидуализированных услуг по охране здоровья в первичной медико-санитарной помощи. Немногие участники (около 10%) также жаловались на необходимость проявлять инициативу при обращении за помощью.Пользователи аварийных приютов и временные обитатели жилья также опасались, что оставление таких приютов поставит под угрозу непрерывность ухода. Что касается адекватности медицинских услуг, все участники выразили признательность за доступность и способность слушать большинство поставщиков услуг, с которыми они столкнулись. Их неудовлетворенные потребности касались восприятия некоторой профессиональной некомпетентности и плохого общения или осуждающего отношения. Другими негативными аспектами, на которые часто обращали внимание, были отсутствие контроля и частая текучесть кадров.Немногие жители постоянного жилья (около 10%) сильно возмущались проверками квартир со стороны персонала, особенно без предупреждения, и чрезмерным надзором в целом.

Что касается удовлетворения потребностей в безопасности, ощущение физической безопасности у всех участников усиливалось присутствием персонала и камерами наблюдения. Однако в основном сообщалось о неудовлетворенных потребностях в области безопасности. Неудовлетворенные потребности в физической безопасности касались случаев краж, насилия, а также неспособности сотрудников экстренного жилья и лиц, проживающих во временном жилье, вмешиваться в кризисные ситуации, что создавало значительную небезопасность.Для пользователей временного убежища и лиц, проживающих во временном жилье, присутствие людей с MHD или SUD увеличивало страх и незащищенность.

Что касается административных / юридических вопросов, неудовлетворенные потребности во всех трех группах касались оформления документов и других проблем, связанных с получением документов государственными органами (например, медицинское страхование, карты социального страхования). Кроме того, очень немногие (менее 5%) участников сообщили о получении рекомендаций по управлению личными финансами или подоходному налогу. Точно так же очень немногие (менее 5%) участников сообщили об удовлетворении потребностей в области образования или занятости.Большинство из них сталкивались с препятствиями, связанными с возрастом, постоянной инвалидностью или стигмой, связанной с бездомностью. Гарантия занятости была особенно важна для жителей постоянного жилья, которым нужно было содержать квартиру и оплачивать счета. Около 15% участников исследования заявили, что они столкнулись с проблемами, связанными с инвалидностью и возрастом, которые мешали им найти или сохранить работу.

Менее 10% участников сообщили о удовлетворенных или неудовлетворенных потребностях в любви и принадлежности. Для пользователей временного жилья и временного жильца удовлетворенные потребности были связаны с возможностью встретить людей, чей опыт был подобен их опыту.Сверстникам можно было доверять, и они были источниками поддержки. Однако на эти две группы отрицательно повлияли их отношения с людьми, имеющими МГД и ССД. Для жителей постоянного жилья удовлетворение потребностей в любви и принадлежности часто означало свободу выбора друзей и удовлетворение их сильного стремления к уединению. Это привело к тому, что некоторые предпочли изолироваться и избегать контактов с соседями.

Наконец, только 20% участников исследования обращались к своим потребностям в самооценке и самоактуализации, указывая на возможности на протяжении всей своей бездомной траектории развития таких навыков, как автономность, оптимизм и устойчивость.Несмотря на то, что они полагались на помощь из различных источников, многие из этих участников признали свою личную ответственность за улучшение своей жизни. Что касается удовлетворения потребностей, жители постоянного жилья выражали в основном чувство выполненного долга, извлеченные уроки и общее удовлетворение обретением некоторой независимости, в то время как пользователи временного жилья и лица, проживающие во временном жилье, как правило, были более настойчивыми или желаемыми в отношении развития навыков.

В целом, это исследование выявило и сравнило воспринимаемые потребности бездомных (пользователи временного убежища, временные жильцы) и лиц, недавно поселившихся (постоянных жителей) в Квебеке, с использованием адаптированной версии иерархии потребностей Маслоу.Полученные данные подтвердили актуальность этой модели для исследования бездомности, при этом наиболее часто сообщаются удовлетворенные / неудовлетворенные основные потребности и уменьшается количество потребностей, выявленных при подъеме по пирамиде. Значительные групповые различия возникли только в отношении базовых потребностей, при этом потребности жителей постоянного жилья были удовлетворены больше, чем у двух других групп. Это указывает на то, что для бездомных удовлетворение основных потребностей, включая жилье, не было достаточным условием для удовлетворения потребностей более высоких категорий. Он также подчеркнул, что удовлетворение основных потребностей не является необходимым для развития и потенциального удовлетворения потребностей в более высоких категориях, таких как здравоохранение и социальные услуги или любовь и принадлежность, что подтвердило предыдущую критику исходной концепции Маслоу [27–29].

Сравнение с другими исследуемыми образцами.

Характеристики нашей выборки отражают различия, а также сходство с образцами, наблюдавшимися в предыдущем исследовании. Основное различие касалось очень высокой доли участников с историей хронической бездомности в этом исследовании, затрагивающей почти половину выборки. Это можно объяснить тем фактом, что подавляющее большинство участников этого исследования были временными жильцами или постоянными жителями жилья, что было бы логично, поскольку эти программы были ориентированы на лиц, хронически бездомных [41], и включали относительно небольшое количество пользователей временного жилья, в отличие от образцов в большинстве предыдущих исследований.Например, по оценкам, только 10% бездомных в США страдают хронической бездомностью [53]. Чрезмерная представленность хронически бездомных участников нашего исследования, особенно среди постоянных жителей жилья, также может объяснить высокую распространенность проблем со здоровьем у участников [53]. Что касается использования медицинских и социальных услуг, наша выборка характеризовалась высокими показателями использования услуг, типичными для бездомных [4, 54, 55]. Три группы сообщили о двукратном увеличении использования отделений неотложной помощи за 12-месячный период по сравнению с населением в целом, и имели больше госпитализаций, особенно пользователей приютов для неотложной помощи, уровень госпитализации которых был почти в четыре раза выше нормы для населения в целом, как показано в предыдущих исследованиях. [23, 56].

Характеристики выборки и групповые сравнения.

Статистические сравнения между тремя категориями жилья (таблица 1) показали, что жители постоянного жилья пользуются значительными преимуществами (например, больше при поддержке семейного врача и ведущего, более низкие показатели SUD и сопутствующие MHD / SUD) по сравнению с другими группами. Это подтвердило нашу гипотезу о том, что у жителей постоянного жилья будет относительно больше или меньше неудовлетворенных потребностей, чем у других групп. Исследования показывают, что наличие семейных врачей и кураторов, вероятно, способствовало стабильности проживания среди бездомных [57], позволяя им реже пользоваться отделениями неотложной помощи и уменьшая количество госпитализаций [44, 55].Однако низкая доля жителей постоянного жилья с ведущим, по-видимому, указывает на то, что большинство из них не проживали в постоянном жилье с поддержкой, как рекомендовано в подходе «Жилье прежде всего». Это может частично объяснить сохранение нескольких неудовлетворенных потребностей в этой группе. Более того, тот факт, что SUD был основной причиной потери жилья среди временных жильцов, кажется, указывает на то, что бездомные с SUD могут рассматриваться как менее благоприятные для программ постоянного жилья. Первоначальная модель Pathway to Housing была ориентирована на бездомных с MHD или одновременным MH / SUD [58], но с тех пор подход Housing First был расширен за счет включения других типов клиентов, а также может включать в себя различные организационные особенности, которых не было. часть оригинальной модели.Те, кто страдает исключительно SUD, могли быть переведены в другие жилые районы. Более того, более высокая распространенность SUD, соматических заболеваний и сопутствующего MHD / SUD среди лиц, проживающих во временном жилье, и пользователей убежища может объяснить их более широкое использование отделений неотложной помощи и более частую госпитализацию, чем среди жителей постоянного жилья.

Качественные результаты также отразили различие между жителями постоянного жилья и другими жителями с точки зрения большей автономии и лучшего уровня комфорта, предлагаемого постоянным жильем.Это совпадает с выводами Henwood et al. [59], предполагая, что качество жизни хронически бездомных лиц повысится, главным образом, в областях, связанных с жизненной ситуацией после перевода в постоянное жилье. Тем не менее, для пользователей временного жилья и лиц, временно проживающих в жилье, отсутствие стабильности в жилищах привело к более опасной ситуации с точки зрения удовлетворения основных потребностей.

Групповые сравнения по категориям потребностей.

Безопасность была единственной категорией, в которой люди сообщали о большем количестве неудовлетворенных, чем удовлетворенных потребностей из-за преобладания агрессии, особенно в отношении пользователей временного жилья и лиц, проживающих во временном жилье, а также административных проблем и безработицы, о которых сообщили все участники.Эти факторы, уже упомянутые в предыдущих исследованиях [15, 21, 60, 61], представляют собой основные препятствия на пути эффективной социальной интеграции среди бездомных, в том числе тех, кто живет в постоянном жилье. Сообщается, что агрессия является важным фактором риска, что позволяет предположить, что бездомные особенно страдают от стигмы и дискриминации со стороны населения в целом. Далее дословно указывалось, что пользователи временного жилья и лица, проживающие во временном жилье без MHD или SUD, также чувствовали себя неуверенно по отношению к своим сверстникам, пострадавшим от этих нарушений.В исследованиях [62] было выявлено, что стигма выше среди бездомных с МГД и / или СНД, чем среди лиц из других групп населения, что может объяснить, почему значительная часть постоянных жителей жилища испытали хроническую бездомность и пострадали от МГД. Преобладание административных проблем в выборке может отражать отсутствие сотрудничества между медицинскими и социальными службами и службами для бездомных, о чем свидетельствуют предыдущие обзоры препятствий на пути оказания помощи бездомным [21].Более того, высокий уровень безработицы среди этих участников исследования, которые жили в основном на социальную помощь как единственный источник дохода, предполагал сохраняющуюся незащищенность в отношении их способности справляться с непредвиденными расходами.

Качественные данные также позволили нам выявить другие интересные различия между группами по другим категориям потребностей, даже при отсутствии значимых количественных различий. Что касается потребностей в медицинских и социальных услугах, результаты показывают, что отсутствие доступа к специализированным услугам MH и SUD, а также к первичной медико-санитарной помощи и услугам на уровне сообществ вызывало сожаление у всех групп.Однако ответы жителей постоянного и временного жилья показали, что направление сотрудников к соответствующим ресурсам могло способствовать повышению адекватности услуг, а такая возможность недоступна для группы приюта.

Что касается любви и принадлежности, то способность удовлетворять потребности, по-видимому, связана с чувством безопасности участников при формировании отношений. Пользователи аварийных приютов и временные жильцы сообщали о постоянной поддержке со стороны лиц с аналогичными проблемами, что было положительным фактором.Исследование, проведенное в США, показало, что у людей с большей социальной поддержкой меньше случаев бездомности [63]. Тем не менее, необходимость находиться в тесном контакте с людьми, страдающими комплексной МГН и / или СНД, возможно, подорвала социальные преимущества групповой жизни для многих. Напротив, как сообщалось ранее [64], некоторые жители постоянного жилья, казалось, избегали отношений, которые могли угрожать их трезвости или эмоциональной стабильности. Как сообщалось в других работах [64, 65], потребности жителей постоянного жилья в любви и принадлежности могут быть омрачены желанием автономии, избирательности в отношениях и конфиденциальности.Изоляция и одиночество среди постоянных жителей жилья, также отмеченные в других исследованиях [16, 66], могли быть необходимой стратегией для обеспечения личной безопасности. Как сообщается в канадском исследовании, посвященном женщинам, жилье не решает проблему бездомности, если оно не сопровождается чувством безопасности [67]. Предыдущие результаты также показали, что постоянное жилье не увеличивает социальную интеграцию [41, 59, 68]; Жители постоянного жилья могут избегать контактов со своими соседями или общественной деятельности, что оправдывает важность построения социальной сети.

Очень немногие участники исследования выразили удовлетворенные или неудовлетворенные потребности с точки зрения самооценки и самореализации. Согласно Wenzel et al. [30], со временем эти потребности будут уменьшаться среди жителей постоянного жилья. Напротив, результаты исследования показали, что пользователи временного жилья и временные жители больше сосредоточились на приобретении необходимых навыков, например, возвращении в школу или участии в творческой деятельности. Многие участники также гордились тем, что обрели внутреннюю силу, чтобы пережить бездомность, как было подтверждено ранее [39].Несмотря на незначительные количественные различия между тремя группами, мы обнаружили неофициальные данные, позволяющие предположить, что некоторые бездомные были способны определять свою жизненную цель и философию жизни, достигая личного удовлетворения, несмотря на серьезные материальные лишения, что аналогично результатам предыдущих исследований. [39, 40]. Однако необходимо будет провести дальнейшие исследования, в том числе с использованием стандартизированных инструментов, прежде чем делать твердые выводы.

Клинические последствия и последствия для общественного здравоохранения .С учетом результатов исследования могут быть рекомендованы определенные вмешательства для удовлетворения важных потребностей. Что касается медицинских и социальных услуг, исследования показали, что ведение пациентов облегчает доступ к услугам и увеличивает непрерывность ухода за бездомными [69]. Таким образом, постоянное жилье «с поддержкой», основанное на подходе «Жилье прежде всего», следует более широко внедрять в постоянный жилищный фонд и назначать индивидуальных координаторов, особенно после первоначального перевода в постоянное жилье, чтобы предотвратить риск рецидива.Во временном жилье также следует более последовательно вести ведение пациентов, в то время как улучшенные информационно-пропагандистские программы могут облегчить доступ к медицинским и социальным услугам для пользователей временного жилья. Принимая во внимание широкую распространенность SUD и сопутствующего MHD / SUD, особенно среди пользователей экстренного убежища и лиц, проживающих во временном жилье, следует рассмотреть меры вмешательства, которые могут облегчить направление в центры реабилитации от наркозависимости, включая размещение медсестер по связям с наркозависимостью в отделениях неотложной помощи.Одна программа, тесно связанная с Housing First, может быть реализована для лечения и последующего наблюдения за бездомными, в первую очередь страдающими от SUD, особенно с хроническими заболеваниями. Более того, более широкий доступ к первичной медицинской помощи через семейных врачей облегчил бы лечение физических заболеваний, распространенных во всех трех группах, но в основном среди лиц, проживающих во временных жилищах. Что касается потребностей в безопасности, следует поощрять профилактику стигмы для бездомных. Более того, поддерживаемые программы занятости, нацеленные на жителей постоянного жилья, могут помочь сохранить стабильность жилья [58].Что касается любви и принадлежности, группы самопомощи и поддержка сверстников [70] могут способствовать развитию социальных сетей, в основном среди жителей постоянного жилья, пострадавших от изоляции и одиночества. Наконец, система, более ориентированная на выздоровление, может способствовать усилению чувства личного мастерства среди бездомных [24]. Дневные центры, например, продвигают различные художественные или развлекательные мероприятия, которые улучшают за счет приобретения навыков личную автономию, самооценку и осознание более значимой жизни.

Менее трети студентов из Калифорнии выполнили или превысили стандарты нового экзамена по естествознанию.

Фото: Кэролайн Джонс / EdSource

Ученики начальной школы занимаются научной деятельностью.

Фото: Кэролайн Джонс / EdSource

Ученики начальной школы занимаются научной деятельностью.

В то время, когда Калифорния уделяет больше внимания естественнонаучному образованию, большинство студентов не набрали высокий балл в новом государственном экзамене по естествознанию, особенно среди нескольких студенческих групп.

Результаты теста были опубликованы на этой неделе. Они представляют собой первые результаты Калифорнийского научного теста, нового теста, разработанного Министерством образования Калифорнии для измерения прогресса в соответствии со Стандартами науки следующего поколения, принятыми в Калифорнии в 2013 году.

Чтобы найти результаты теста по школе или округу, перейдите сюда.

По всему штату 32 процента пятиклассников, 31 процент восьмиклассников и 28 процентов старшеклассников выполнили или превзошли стандарты калифорнийского теста по естественным наукам, соответствующие новым стандартам.

Баллы также показывают большой разрыв между чернокожими и латиноамериканскими учениками и их белыми и азиатскими сверстниками: по всем классам 14 процентов чернокожих учеников и 19 процентов латиноамериканских учеников соответствовали стандартам или превышали их, по сравнению с 44 процентами белых учеников и 59 процентами. азиатских студентов.

Числа с меньшими процентами будут отображаться при наведении курсора или щелчке мышью:

Доля студентов, которые соответствовали стандартам или превышали их, была также поразительно низкой среди изучающих английский язык (3 процента), студентов специального образования (8 процентов) и студентов с низкими доходами (19 процентов).

«Чтобы все стало правильно, нужны время и деньги, - сказала Шона Меткалф, президент Калифорнийской ассоциации учителей естественных наук. «Калифорнийские научные стандарты нового поколения были приняты шесть лет назад без надлежащего финансирования со стороны штата», имея в виду, что государственные чиновники не выделили никаких долларов на конкретное финансирование внедрения новых научных стандартов.

Калифорния претерпевает серьезные изменения в способах преподавания естественных наук, чтобы подготовить больше студентов к поступлению в колледж и сделать карьеру в области естественных наук, технологий, математики и инженерии или STEM, а также расширить научное понимание всех студентов.В 2013 году штат принял Стандарты науки нового поколения, чтобы заменить старые стандарты, введенные в действие в 1998 году. В 2016 году Государственный совет по образованию выпустил структуру учебной программы, чтобы помочь учителям в их реализации.

«Что действительно выделялось для меня, когда я углубился в оценки, так это то, что я продолжал видеть досадные разрывы между студенческими группами», - сказала Джессика Савко, заместитель директора Калифорнийской сети STEM, проекта «Дети сейчас», правозащитной организации. базируется в Окленде.«Сейчас прилагается так много усилий, чтобы диверсифицировать нашу рабочую силу в области STEM; трубопровод действительно начинается в К-12, и нам необходимо улучшить эти возможности ». Савко ранее был исполнительным директором Калифорнийской ассоциации учителей естественных наук.

«Эти оценки подтверждают тенденции, которые мы видим в других данных и других государственных тестах», - сказал Кристофер Неллум, заместитель директора по исследованиям и политике Education Trust-West, организации, занимающейся исследованием гражданских прав и равноправия в образовании, а также правозащитной организацией. «Для нас это подчеркивает, что системы образования терпят неудачу у афроамериканцев, латиноамериканцев, изучающих английский язык и студентов с низкими доходами.И из-за этого мы не отвечаем государственным научным стандартам ».

Новые стандарты требуют значительного изменения способа преподавания естественных наук. Вместо запоминания фактов и терминов в Стандартах науки следующего поколения упор делается на практические научные проекты, которые требуют от студентов исследования, сбора и использования данных и предоставления основанных на доказательствах объяснений того, что они обнаруживают.

Новые стандарты также объединяют несколько научных дисциплин и поощряют учителей основывать уроки на вопросах учеников и научном опыте, с которым они могут столкнуться в повседневной жизни, например, о местной дикой природе или близлежащих энергетических ресурсах.

Точно так же новый научный компьютерный тест резко отличается от предыдущего научного теста. В дополнение к новому содержанию в таких областях, как изменение климата, учащихся просят на новом тесте проанализировать данные и объяснить свои рассуждения.

«Многие задачи теста в значительной степени зависят от навыков грамотности», - сказала Бренда Туохи, директор STEM в Oakland Unified. «Студенты должны уметь получать информацию и строить аргументы, поэтому новый тест требует гораздо большего количества языков.”

Результаты нового теста по естественным наукам за первый год сопоставимы с результатами за первый год теста Smarter Balanced по математике. В 2015 году студенты первого курса сдали тесты Smarter Balanced, которые соответствуют математическим стандартам Common Core; 33 процента студентов из Калифорнии выполнили или превзошли стандарты. Эти тесты также показывают большое неравенство между этническими и расовыми группами, которое часто называют разрывом в успеваемости.

Поскольку это первый год проведения нового теста, невозможно узнать, как успеваемость учащихся сравнивается с предыдущими годами.

Но экспертов по-прежнему беспокоит то, что они считают тревожной линией тренда. «Конечно, это первый год таких оценок, но мы наблюдаем большие пробелы в достижениях в течение некоторого времени, и оценки по науке подтверждают то, что мы наблюдаем», - сказала Неллум.

Экзамен по естествознанию сдается учащимся 5–8 классов и один раз в старшей школе, начиная с 10 класса. Тест ориентирован на три области науки: науки о Земле и космосе, науки о жизни и физические науки.

Тест состоит из вопросов с несколькими вариантами ответов и заданий на успеваемость, которые требуют от учащихся решить ряд связанных вопросов и объяснить, как они пришли к своим ответам.

Ряд препятствий, таких как задержка в некоторых округах с принятием учебников и нехватка квалифицированных учителей естественных наук по всему штату, заставили многие школы бороться с внедрением новых стандартов. Спустя почти пять лет после принятия стандартов осенью 2018 года государственные чиновники утвердили список научных материалов, что дало районам мало времени для проверки и выбора учебников до начала периода тестирования весной 2019 года.

Некоторые районы начали или даже завершили процесс принятия учебников. Но многие еще не научились преподавать науку с использованием материалов, соответствующих предыдущим стандартам. В результате некоторые учителя воздерживаются от внедрения новых стандартов, а их ученики продолжают изучать старые научные стандарты по устаревшим учебникам.

Задача особенно сложна на уровне средней школы, потому что на рынке еще мало учебников, соответствующих новым стандартам.Многие средние школы также ищут способы наилучшего изменения последовательности курсов и требований к выпускным экзаменам, чтобы лучше соответствовать стандартам.

«К сожалению, без надлежащего финансирования новых учебных материалов и ресурсов внедрение CA NGSS было непоследовательным по всему штату», - сказал Меткалф.

Постоянные пробелы в доступе к научным курсам и материалам могут привести к большим различиям в возможностях и результатах научного обучения. «Мы не удивлены, что оценки по естественным наукам показывают одинаковые разрывы между студентами по (английскому языку искусства) и по математике», - сказала она, имея в виду оценку Smarter Balanced, которую студенты также должны проходить каждую весну.

Добавляет к списку проблем нехватку высококвалифицированных учителей в Калифорнии, особенно в области естественных наук. Согласно данным Калифорнийской комиссии по аттестации учителей, по всем научным дисциплинам количество выданных свидетельств о преподавании сократилось почти на 9 процентов в период с 2013-14 по 2017-18 годы.

По словам Туохи, в средней школе

Fremont в Окленде не было учителя физики в течение трех лет, пока учитель математики не подошел, чтобы получить дополнительные свидетельства для преподавания этого предмета в этом году.«Многие наши студенты не имеют доступа к (физике)», - сказала она. «Есть несколько факторов, и очень важно найти квалифицированных учителей».

Нехватка учителей естественных наук особенно остро ощущается в сельских школах, а также школах, которые обслуживают значительную часть учащихся с низким доходом, и школах, где большинство учащихся являются чернокожими или латиноамериканцами, согласно отчету Института политики обучения за 2018 год. Образовательная исследовательская организация в Пало-Альто.

«Я ходила в школу, в которой не было лучших учителей и не было свободных классов, и это важно, потому что потом трудно наверстать упущенное», - сказала Неллум.«Мы хотим, чтобы родители думали о том, как их дети имеют доступ к курсам, чтобы у них была основа для получения высшего образования».

В этом году губернатор Гэвин Ньюсом предлагает выделить почти 1 миллиард долларов на набор, обучение и удержание учителей в критически неукомплектованных областях, включая естественные науки, математику и специальное образование.

Баллы предназначены для измерения того, насколько хорошо школа внедряет новые стандарты, и должностные лица системы образования предостерегают от сравнения баллов с результатами предыдущего экзамена, который был приведен в соответствие со старыми стандартами.

Оценки будут иметь значение и для родителей. Многие школы и округа не используют полученные баллы при зачислении на курсы естественных наук, но могут. Официальные лица штата советуют «школам не использовать эти результаты в качестве единственной меры для размещения учащихся на каких-либо курсах или направлениях углубленного изучения естественных наук», - сказал Скотт Рорк, представитель Департамента образования Калифорнии.

Родители могут найти здесь советы по интерпретации и пониманию результатов своего ребенка, а также образцы вопросов теста.

«Инновации заложены в ДНК этого штата, - сказала Неллум. «Должен быть путь вперед, и это должно происходить быстрее, чем это происходит сейчас».

Чтобы получать больше отчетов, подобных этому, нажмите здесь, чтобы подписаться на бесплатную ежедневную рассылку EdSource о последних событиях в сфере образования.

Функция тирозинкиназы рецептора c-Met в канцерогенезе и связанные с ней терапевтические возможности | Молекулярный рак

  • 1.

    Salgia R. MET при раке легких: выбор биомаркеров, основанный на научном обосновании.Mol Cancer Ther. 2017; 16: 555–65.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 2.

    Fu YT, Zheng HB, Zhou L, Zhang DQ, Liu XL, Sun H. Вальпроевая кислота воздействует на папиллярный рак щитовидной железы посредством ингибирования пути передачи сигналов c-Met. Am J Transl Res. 2017; 9: 3138–47.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 3.

    Rucki AA, Xiao Q, Muth S, Chen J, Che X, Kleponis J, Sharma R, Anders RA, Jaffee EM, Zheng L.Двойное ингибирование путей Hedgehog и c-Met для лечения рака поджелудочной железы. Mol Cancer Ther. 2017; 16: 2399-409.

  • 4.

    Zhu L, Xiong X, Kim Y, Okada N, Lu F, Zhang H, Sun H. Кислая сфингомиелиназа необходима для презентации тирозинкиназы рецептора met в раковых клетках на клеточной поверхности. J Cell Sci. 2016; 129: 4238–51.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 5.

    Лю У.Звездчатые клетки печени способствовали инвазии клеток гепатомы через сигнальный путь HGF / c-Met, регулируемый p53. Клеточный цикл. 2016; 15: 886–94.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 6.

    Zhang Y, Du Z, Zhang M. Разработка биомаркеров в терапии, направленной на МЕТ. Oncotarget. 2016; 7: 37370–89.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 7.

    Szturz P, Raymond E, Abitbol C, Albert S, de Gramont A, Faivre S. Понимание передачи сигналов c-MET при плоскоклеточном раке головы и шеи. Crit Rev Oncol Hematol. 2017; 111: 39–51.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 8.

    Ким Б., Юнг Н., Ли С., Сон Дж. К., Юнг Х. Дж. Апигенин подавляет фенотипы раковых стволовых клеток в клетках глиобластомы человека посредством подавления передачи сигналов c-Met. Phytother Res. 2016; 30: 1833–40.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 9.

    International Cancer Genome Consortium PedBrain Tumor P. Рекуррентные гибридные гены MET представляют собой лекарственную мишень при детской глиобластоме. Nat Med. 2016; 22: 1314–20.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 10.

    Имура Й, Накай Т., Ямада С., Оутани Х, Такенака С., Хамада К., Араки Н., Ито К., Йошикава Х, Нака Н.Функциональная и терапевтическая значимость передачи сигналов фактора роста гепатоцитов / c-MET при синовиальной саркоме. Cancer Sci. 2016; 107: 1867–76.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 11.

    Liang Y, Liu J, Liu T., Yang X. Антитела Anti-c-Met, биоконъюгированные с полыми золотыми наносферами, в качестве нового наноматериала для направленной радиационной абляции клеток рака шейки матки человека. Oncol Lett. 2017; 14: 2254–60.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 12.

    Pilotto S, Carbognin L, Karachaliou N, Ma PC, Rosell R, Tortora G, Bria E. Отслеживание избавления от зависимости от МЕТ при раке легких: путь к онкогенной цели. Лечение рака Ред. 2017; 60: 1–11.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 13.

    Wu JC, Wang CT, Hung HC, Wu WJ, Wu DC, Chang MC, Sung PJ, Chou YW, Wen ZH, Tai MH. Гетеронемин - новый ингибитор c-Met / STAT3 против прогрессирующих клеток рака простаты. Простата.2016; 76: 1469–83.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 14.

    Safaie Qamsari E, Safaei Ghaderi S, Zarei B, Dorostkar R, Bagheri S, Jadidi-Niaragh F, Somi MH, Yousefi M. Рецептор c-Met: значение для таргетной терапии колоректального рака. Tumor Biol. 2017; 39: 1010428317699118.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 15.

    Hughes PE, Rex K, Caenepeel S, Yang Y, Zhang Y, Broome MA, Kha HT, Burgess TL, Amore B, Kaplan-Lefko PJ, et al.Активность in vitro и in vivo AMG 337, мощного и селективного ингибитора МЕТ-киназы, в моделях МЕТ-зависимого рака. Mol Cancer Ther. 2016; 15: 1568–79.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 16.

    Куанг В., Дэн К., Дэн С., Ли В., Шу С., Чжоу М. Фактор роста гепатоцитов индуцирует инвазию клеток рака молочной железы через сигнальные пути PI3K / Akt и p38 MAPK, повышая экспрессию COX2. . Am J Transl Res. 2017; 9: 3816–26.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 17.

    Leung E, Xue A, Wang Y, Rougerie P, Sharma VP, Eddy R, Cox D, Condeelis J. Направленный на эндотелий кровеносных сосудов поток опухолевых клеток в опухолях молочной железы требует сигнального пути HGF / C-Met . Онкоген. 2017; 36: 2680–92.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 18.

    Bahrami A, Shahidsales S, Khazaei M, Ghayour-Mobarhan M, Maftouh M, Hassanian SM, Avan A.c-Met как потенциальная мишень для лечения рака желудочно-кишечного тракта: текущее состояние и перспективы на будущее. J. Cell Physiol. 2017; 232: 2657–73.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 19.

    Барроу-МакГи Р., Киши Н., Жоффр С., Менар Л., Эрвье А., Бакуш Б.А., Новаль А.Дж., Май А., Гусман С., Роберт-Массон Л. и др. Кооперация бета-1-интегрин-c-Met выявляет внутреннюю передачу сигналов выживания на связанных с аутофагией эндомембранах.Nat Commun. 2016; 7: 11942.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 20.

    Каенепил С., Кук К., Уодсворт С., Хуанг Дж., Роберт Л., Морено Б. Х., Паризи Дж., Каджулис Е., Кендалл Р., Белтран П. и др. Ингибирование пути MAPK индуцирует уровни MET и GAB1, прививая мутантную меланому BRAF для спасения с помощью фактора роста гепатоцитов. Oncotarget. 2017; 8: 17795–809.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 21.

    Li Y, Liu H, Chen J. Нарушение регуляции сигнального пути HGF / c-Met и их нацеленные лекарства при раке легких. Чжунго Фэй Ай За Чжи. 2014; 17: 625–34.

    PubMed Google Scholar

  • 22.

    Инь Б, Лю З., Ван И, Ван Х, Лю В., Ю П, Дуань Х, Лю Ц., Чен И, Чжан И и др. RON и c-Met способствуют метастазированию через сигнальный путь ERK в клетках рака простаты. Онкол Реп. 2017; 37: 3209–18.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 23.

    Hass R, Jennek S, Yang Y, Friedrich K. Экспрессия и активность c-Met при урогенитальном раке - новые аспекты передачи сигналов и медицинские последствия. Сигнал сотовой связи. 2017; 15:10.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 24.

    Al-U'datt DGF, Al-Husein BAA, Qasaimeh GR. Мини-обзор c-Met как потенциальной терапевтической мишени при меланоме. Biomed Pharmacother. 2017; 88: 194–202.

    PubMed Статья CAS Google Scholar

  • 25.

    Cecchi F, Rabe DC, Bottaro DP. Нацеленность на сигнальный путь HGF / met при раке. Eur J Cancer. 2010; 46: 1260–70.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 26.

    Cecchi F, Rabe DC, Bottaro DP. Нацеленность на сигнальный путь HGF / met в терапии рака. Эксперт считает, что цели. 2012; 16: 553–72.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 27.

    Розарио М. Как сделать пробирки: передача сигналов тирозинкиназой рецептора met. Trends Cell Biol. 2003. 13: 328–35.

    PubMed Статья CAS Google Scholar

  • 28.

    Фогель В., Ульрих А. Множественные in vivo фосфорилированные тирозинфосфатазы SHP-2 связываются с Grb2 через тирозин 584. Рост клеток отличается. 1996; 7: 1589–97.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 29.

    Ван М., Чжао Дж, Чжан Л., Вэй Ф, Лянь И, Ву И, Гун З, Чжан С., Чжоу Дж, Цао К. и др. Роль микросреды опухоли в онкогенезе. J Рак. 2017; 8: 761–73.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 30.

    Либманн С. Регулирование активности киназы MAP с помощью пути передачи сигнала пептидного рецептора: парадигмы множественности. Сотовый сигнал. 2001; 13: 777–85.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 31.

    Shaw RJ, Cantley LC. Передача сигналов Ras, PI (3) K и mTOR контролирует рост опухолевых клеток. Природа. 2006; 441: 424–30.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 32.

    Mottet D, Dumont V, Deccache Y, Demazy C, Ninane N, Raes M, Michiels C. Регулирование уровня белка фактора-1альфа, индуцируемого гипоксией, в условиях гипоксии с помощью фосфатидилинозитол-3-киназы / Akt / гликогена путь синтазы киназы 3beta в клетках HepG2. J Biol Chem.2003; 278: 31277–85.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 33.

    Jiang BH, Liu LZ. Передача сигналов AKT в регуляции ангиогенеза. Curr Cancer Drug Targets. 2008; 8: 19–26.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 34.

    Holland JD, Gyorffy B, Vogel R, Eckert K, Valenti G, Fang L, Lohneis P, Elezkurtaj S, Ziebold U, Birchmeier W. Комбинированные сигналы Wnt / beta-catenin, met и CXCL12 / CXCR4 охарактеризовать базальный рак молочной железы и спрогнозировать исход болезни.Cell Rep. 2013; 5: 1214–27.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 35.

    Tuynman JB, Vermeulen L, Boon EM, Kemper K, Zwinderman AH, Peppelenbosch MP, Richel DJ. Ингибирование циклооксигеназы-2 подавляет активность киназы c-Met и активность Wnt при раке толстой кишки. Cancer Res. 2008; 68: 1213–20.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 36.

    Ким К. Х., Сеол Х. Дж., Ким Э. Х., Ри Дж., Джин Х. Дж., Ли Й, Джу К. М., Ли Дж., Нам Д. Х.Передача сигналов Wnt / бета-катенина является ключевым нижестоящим медиатором передачи сигналов MET в стволовых клетках глиобластомы. Нейроонкология. 2013; 15: 161–71.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 37.

    Previdi S, Maroni P, Matteucci E, Broggini M, Bendinelli P, Desiderio MA. Взаимодействие между метастазами рака груди человека и костным микроокружением через пути активированного фактора роста гепатоцитов / met и бета-катенин / Wnt. Eur J Cancer.2010; 46: 1679–91.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 38.

    Tortelote GG, Reis RR, de Almeida MF, Abreu JG. Сложность пути Wnt / бетакатенин: поиск модели активации. Сотовый сигнал. 2017; 40: 30–43.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 39.

    Wu C, Zhuang Y, Jiang S, Liu S, Zhou J, Wu J, Teng Y, Xia B, Wang R, Zou X.Взаимодействие между путем Wnt / бета-катенин и микроРНК регулирует эпителиально-мезенхимальный переход при раке желудка (обзор). Int J Oncol. 2016; 48: 2236–46.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 40.

    Янь Кью, Цзэн З., Гонг З., Чжан В, Ли Х, Хе Б, Сонг И, Ли Кью, Цзэн И, Ляо Ц. EBV-miR-BART10-3p облегчает эпителиально-мезенхимальный переход и способствует метастазированию карциномы носоглотки, воздействуя на BTRC.Oncotarget. 2015; 6: 41766–82.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 41.

    Arend RC, Londono-Joshi AI, Straughn JM Jr, Buchsbaum DJ. Путь Wnt / бета-катенин при раке яичников: обзор. Gynecol Oncol. 2013; 131: 772–9.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 42.

    Mariani M, McHugh M, Petrillo M, Sieber S, He S, Andreoli M, Wu Z, Fiedler P, Scambia G, Shahabi S, Ferlini C.Ось HGF / c-Met управляет агрессивностью рака в условиях неоадъювантного рака яичников. Oncotarget. 2014; 5: 4855–67.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 43.

    Raman JD. Re: прогностическое значение MET, RON и гистопрогностических факторов для уротелиальной карциномы верхних мочевыводящих путей. Э. Компера, М. Рупре, Э. Шартье-Кастлер, М. О. Биткер, Ф. Ричард, П. Кампаро, Ф. Капрон и О. Куссено. J Urol 2008; 179: 868-872.J Urol. 2008; 180: 1183. ответ автора 1183-1184

    PubMed Статья Google Scholar

  • 44.

    Cheng HL, Liu HS, Lin YJ, Chen HH, Hsu PY, Chang TY, Ho CL, Tzai TS, Chow NH. Совместная экспрессия RON и MET является прогностическим индикатором для пациентов с переходно-клеточной карциномой мочевого пузыря. Br J Рак. 2005; 92: 1906–14.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 45.

    Maggiora P. Онкогены RON и MET коэкспрессируются в карциномах яичников человека и взаимодействуют в активации инвазивности. Exp Cell Res. 2003. 288: 382–9.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 46.

    McClaine RJ, Marshal AM, Wagh PK, Waltz SE. Активация тирозинкиназы рецептора Ron придает устойчивость к тамоксифену в клеточных линиях рака молочной железы. Неоплазия. 2010; 12: 650–8.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 47.

    Previdi S, Abbadessa G, Dalo F, France DS, Broggini M. Метастазы в кости, вызванные раком груди, могут быть эффективно уменьшены с помощью специфического ингибитора c-MET тивантиниба (ARQ 197) и нокдауна shRNA c-MET. Mol Cancer Ther. 2012; 11: 214–23.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 48.

    Такеучи Х., Бильчик А., Саха С., Тернер Р., Визе Д., Танака М., Куо С., Ван Х. Дж., Хун Д. С.. Уровень экспрессии c-MET при первичном раке толстой кишки: предиктор инвазии опухоли и метастазов в лимфатические узлы.Clin Cancer Res. 2003; 9: 1480–8.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 49.

    Zhao S, Ammanamanchi S, Brattain M, Cao L, Thangasamy A, Wang J, Freeman JW. Smad4-зависимая передача сигналов TGF-бета подавляет зависимую от тирозинкиназы рецептора RON подвижность и инвазию клеток рака поджелудочной железы. J Biol Chem. 2008; 283: 11293–301.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 50.

    Benvenuti S, Lazzari L, Arnesano A, Li Chiavi G, Gentile A, Comoglio PM. Трансфосфорилирование киназы Ron поддерживает зависимость от онкогенов MET. Cancer Res. 2011; 71: 1945–55.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 51.

    Gaudino G, Follenzi A, Naldini L, Collesi C, Santoro M, Gallo KA, Godowski PJ, Comoglio PM. RON представляет собой гетеродимерный рецептор тирозинкиназы, активируемый гомологом HGF MSP. EMBO J. 1994; 13: 3524–32.

    CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 52.

    Follenzi A, Bakovic S, Gual P, Stella MC, Longati P, Comoglio PM. Перекрестный разговор между встреченными протоонкогенами и Роном. Онкоген. 2000; 19: 3041–9.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 53.

    Heldin CH. Димеризация рецепторов клеточной поверхности при передаче сигнала. Клетка. 1995; 80: 213–23.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 54.

    Peace BE, Hughes MJ, Degen SJ, Waltz SE. Точечные мутации и сверхэкспрессия Ron вызывают трансформацию, образование опухоли и метастазирование. Онкоген. 2001; 20: 6142–51.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 55.

    Pinkas-Kramarski R, Shelly M, Glathe S, Ratzkin BJ, Yarden Y. Фактор дифференцировки Neu / изоформы нейрегулина активируют различные комбинации рецепторов.J Biol Chem. 1996; 271: 19029–32.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 56.

    Чжао С., Цао Л., Фриман Дж. В.. Нокдаун киназы рецептора RON задерживает, но не предотвращает прогрессирование опухоли, одновременно усиливая передачу сигналов HGF / MET в клеточных линиях рака поджелудочной железы. Онкоген. 2013; 2: e76.

    CAS Статья Google Scholar

  • 57.

    Ван М.Х., Ван Д., Чен Ю.Онкогенные и инвазивные потенциалы человеческого рецептора белка, стимулирующего макрофаги, тирозинкиназы рецептора RON. Канцерогенез. 2003. 24: 1291–300.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 58.

    Чаудхури А., Се М.Х., Ян Б., Махапатра К., Лю Дж., Марстерс С., Бодепуди С., Ашкенази А. Отчетливое участие адаптерных белков Gab1 и Grb2 в передаче сигнала соответствующими рецепторными тирозинкиназами RON и ВСТРЕТИЛИСЬ.J Biol Chem. 2011; 286: 32762–74.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 59.

    Логан-Коллинз Дж., Томас Р. М., Ю. П., Жакиш Д., Моз Э., Френч Р., Стюарт В., Макклейн Р., Ароноу Б., Хоффман Р. М. и др. Подавление передачи сигналов рецептора RON способствует апоптозу и чувствительности к гемцитабину при раке поджелудочной железы. Cancer Res. 2010; 70: 1130–40.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 60.

    Velpula KK, Dasari VR, Asuthkar S, Gorantla B, Tsung AJ. Перекрестная связь EGFR и c-Met в глиобластоме и ее регуляция стволовыми клетками пуповинной крови человека. Перевод Онкол. 2012; 5: 379 – IN318.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 61.

    McDermott U, Pusapati RV, Christensen JG, Gray NS, Settleman J. Приобретенная устойчивость клеток немелкоклеточного рака легких к ингибированию киназы MET опосредуется переключением на зависимость от рецептора эпидермального фактора роста.Cancer Res. 2010; 70: 1625–34.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 62.

    Агарвал С., Церилло С., Колмакова Дж., Кристенсен Дж. Г., Харрис Л. Н., Римм Д. Л., Дигиованна М. П., Стерн Д. Ф.. Ассоциация конститутивно активированного рецептора фактора роста гепатоцитов (встреченного) с устойчивостью к двойному ингибитору EGFR / Her2 в клетках немелкоклеточного рака легкого. Br J Рак. 2009; 100: 941–9.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 63.

    Брейндель Дж. Л., Хаскинс Дж. В., Коуэлл Е. П., Чжао М., Нгуен Д. Х., Стерн Д. Рецептор EGF активирует MET через MAPK для усиления инвазии немелкоклеточной карциномы легкого и метастазирования в мозг. Cancer Res. 2013; 73: 5053–65.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 64.

    Mueller KL, Hunter LA, Ethier SP, Boerner JL. Met и c-Src взаимодействуют, чтобы компенсировать потерю активности киназы рецептора эпидермального фактора роста в клетках рака груди.Cancer Res. 2008; 68: 3314–22.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 65.

    Ramalingam SS, Owonikoko TK, Khuri FR. Рак легкого: новые биологические открытия и недавние терапевтические достижения. CA Cancer J Clin. 2011; 61: 91–112.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 66.

    Ван В., Ли К., Такеучи С., Ямада Т., Коидзуми Н., Накамура Т., Мацумото К., Мукаида Н., Нисиока Ю., Соне С. и др.Ингибитор Met-киназы E7050 обращает вспять три различных механизма резистентности к ингибитору тирозинкиназы, индуцированной фактором роста гепатоцитов, при мутантном EGFR раке легких. Clin Cancer Res. 2012; 18: 1663–71.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 67.

    Энгельман Дж. А., Зейнуллаху К., Мицудоми Т., Сонг Й., Хайленд С., Парк Дж. О., Линдеман Н., Гейл С. М., Чжао Х, Кристенсен Дж. И др. Амплификация МЕТ приводит к устойчивости к гефитинибу при раке легких за счет активации передачи сигналов ERBB3.Наука. 2007; 316: 1039–43.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 68.

    Бенедеттини Э., Шолл Л.М., Пейтон М., Рейли Дж., Уэр С., Дэвис Л., Вена Н., Бейли Д., Йеап Б.И., Фиорентино М. и др. Активация Met при немелкоклеточном раке легкого связана с устойчивостью de novo к ингибиторам EGFR и развитием метастазов в мозг. Am J Pathol. 2010; 177: 415–23.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 69.

    Секвист Л.В., Мартинс Р.Г., Спигель Д., Грюнберг С.М., Спира А., Янне П.А., Джоши В.А., Макколлум Д., Эванс Т.Л., Музиканский А. и др. Гефитиниб первой линии у пациентов с далеко зашедшим немелкоклеточным раком легкого, несущим соматические мутации EGFR. J Clin Oncol. 2008; 26: 2442–9.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 70.

    Тюрк А.Б., Зейнуллаху К., Ву Ю.Л., Сонг Й., Диас-Сантагата Д., Лифшиц Э., Тоши Л., Роджерс А., Мок Т., Секвист Л. и др.Предсуществование и клональный отбор амплификации MET в мутантном EGFR NSCLC. Раковая клетка. 2010; 17: 77–88.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 71.

    Рагхав К.П., Гонсалес-Ангуло А.М., Блюменшейн Г.Р. Младший. Роль оси HGF / MET в устойчивости рака легкого к современному лечению. Перевод Lung Cancer Res. 2012; 1: 179–93.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 72.

    Капоши-Новак П., Ли Дж. С., Гомес-Кирос Л., Кулуарн С., Фактор В. М., Торгейрссон СС. Сигнатура экспрессии, регулируемая Met, определяет подмножество гепатоцеллюлярной карциномы человека с плохим прогнозом и агрессивным фенотипом. J Clin Invest. 2006; 116: 1582–95.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 73.

    Ke AW, Shi GM, Zhou J, Wu FZ, Ding ZB, Hu MY, Xu Y, Song ZJ, Wang ZJ, Wu JC и др. Роль сверхэкспрессии CD151 и / или c-Met в прогнозировании прогноза гепатоцеллюлярной карциномы.Гепатология. 2009; 49: 491–503.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 74.

    Wang ZL, Liang P, Dong BW, Yu XL, Yu DJ. Факторы прогноза и рецидив малой гепатоцеллюлярной карциномы после резекции печени или микроволновой абляции: ретроспективное исследование. J Gastrointest Surg. 2008; 12: 327–37.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 75.

    Уэки Т., Фудзимото Дж., Сузуки Т., Ямамото Х., Окамото Э.Экспрессия фактора роста гепатоцитов и его рецептора протоонкогена c-met в гепатоцеллюлярной карциноме. Гепатология. 1997. 25: 862–6.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 76.

    Viticchie G, PAJ M. c-Met и другие молекулы клеточной поверхности: взаимодействие, активация и функциональные последствия. Биомедицина. 2015; 3: 46–70.

    CAS Статья Google Scholar

  • 77.

    You H, Ding W, Dang H, Jiang Y, Rountree CB. c-Met представляет собой потенциальную терапевтическую мишень для индивидуального лечения гепатоцеллюлярной карциномы. Гепатология. 2011; 54: 879–89.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 78.

    Ярден Ю. Семейство EGFR и его лиганды при раке человека. Сигнальные механизмы и терапевтические возможности. Eur J Cancer. 2001; 37 (Приложение 4): S3–8.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 79.

    Merchant M, Ma X, Maun HR, Zheng Z, Peng J, Romero M, Huang A, Yang NY, Nishimura M, Greve J и др. Конструкция моновалентных антител и механизм действия онартузумаба, антагониста МЕТ с противоопухолевой активностью, в качестве терапевтического агента. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2013; 110: E2987–96.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 80.

    Джелсомино Ф, Факкинетти Ф, Хаспингер ЭР, Гарассино МС, Трусолино Л, Де Брауд Ф, Тисео М.Ориентация на ген MET для лечения немелкоклеточного рака легкого. Crit Rev Oncol Hematol. 2014; 89: 284–99.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 81.

    Camidge DR, Ou SHI, Shapiro G, Otterson GA, Villaruz LC, Villalona-Calero MA. Эффективность и безопасность кризотиниба у пациентов с распространенным немелкоклеточным раком легкого (НМРЛ), усиленным c-MET. 2014.

  • 82.

    Shea M, Costa DB, Rangachari D.Управление распространенным немелкоклеточным раком легких с известными мутациями или перестройками: новейшие доказательства и подходы к лечению. Ther Adv Respir Dis. 2016; 10: 113–29.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 83.

    Факкинетти Ф., Росси Г., Бриа Е., Сория Дж. К., Бессе Б., Минари Р., Фрибуле Л., Тисео М. Зависимость от онкогенов при немелкоклеточном раке легкого: внимание к ингибированию ROS1. Cancer Treat Rev. 2017; 55: 83–95.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 84.

    Хуан ХХ, Се Ф.Ф., Хоу Л.Дж., Чен ХХ, Оу РЙ, Ю Й.Т., Цю Дж.Г., Чжан У.Дж., Цзян К.В., Ян Й. и др. Кризотиниб взаимодействует с цисплатином на доклинических моделях рака яичников. Am J Transl Res. 2017; 9: 1667–79.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 85.

    Стэнли А., Ашрафи Г. Х., Седдон А. М., Моджтахеди Х. Синергетические эффекты различных ее ингибиторов в сочетании с нацеливающими агентами IGF-1R, c-Met и Src в клеточных линиях рака молочной железы.Научный отчет 2017; 7: 3964.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 86.

    Вергот И.Б., Смит, округ Колумбия, Бергер Р., Курцрок Р., Фогельзанг, штат Нью-Джерси, Селла А., Уилер Дж., Ли Ю., Фостер П.Г., Вайцман Р., Буканович Р.Дж. Рандомизированное исследование фазы 2 прекращения приема кабозантиниба у пациентов с карциномой яичников. Eur J Cancer. 2017; 83: 229–36.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 87.

    Escudier B, Lougheed JC, Albiges L. Кабозантиниб для лечения почечно-клеточного рака. Эксперт Opin Pharmacother. 2016; 17: 2499–504.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 88.

    Bentzien F, Zuzow M, Heald N, Gibson A, Shi Y, Goon L, Yu P, Engst S, Zhang W, Huang D, et al. Активность кабозантиниба (XL184), ингибитора RET, MET и VEGFR2, in vitro и in vivo на модели медуллярного рака щитовидной железы.Щитовидная железа. 2013; 23: 1569–77.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 89.

    Choueiri TK, Escudier B, Powles T., Tannir NM, Mainwaring PN, Rini BI, Hammers HJ, Donskov F, Roth BJ, Peltola K, et al. Кабозантиниб в сравнении с эверолимусом при запущенной почечно-клеточной карциноме (METEOR): окончательные результаты рандомизированного открытого исследования фазы 3. Ланцетная онкология. 2016; 17: 917–27.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 90.

    Shintani T, Kusuhara Y, Daizumoto K, Dondoo TO, Yamamoto H, Mori H, Fukawa T., Nakatsuji H, Fukumori T., Takahashi M, Kanayama H. ​​Участие в передаче сигналов металлопротеиназы 1 фактора роста гепатоцитов-MET-матрицы металлопротеиназы 1 в раке мочевого пузыря инвазивность и распространение. Влияние ингибитора МЕТ, кабозантиниба (XL184) на клетки рака мочевого пузыря. Урология. 2017; 101: 169 e167–13.

    Артикул Google Scholar

  • 91.

    Shah MA, Wainberg ZA, Catenacci DV, Hochster HS, Ford J, Kunz P, Lee FC, Kallender H, Cecchi F, Rabe DC, et al.Исследование фазы II, оценивающее 2 схемы приема перорального форетиниба (GSK1363089), ингибитора cMET / VEGFR2, у пациентов с метастатическим раком желудка. PLoS One. 2013; 8: e54014.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 92.

    Choueiri TK, Vaishampayan U, Rosenberg JE, Logan TF, Harzstark AL, Bukowski RM, Rini BI, Srinivas S, Stein MN, Adams LM, et al. Фаза II и исследование биомаркеров двойного ингибитора MET / VEGFR2 форетиниба у пациентов с папиллярной почечно-клеточной карциномой.J Clin Oncol. 2013; 31: 181–6.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 93.

    Chia SK, Ellard SL, Mates M, Welch S, Mihalcioiu C, Miller WH Jr, Gelmon K, Lohrisch C, Kumar V, Taylor S, et al. Фаза I исследования лапатиниба в комбинации с форетинибом, c-MET, AXL и ингибитором рецептора фактора роста эндотелия сосудов, при метастатическом метастатическом раке молочной железы, положительном по рецептору 2 эпидермального фактора роста человека (HER-2). Рак молочной железы Res.2017; 19:54.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 94.

    Ченг Х., Чуа В., Ляо К., Пурвин Т.Дж., Тераи М., Кагеяма К., Дэвис М.А., Сато Т., Аплин А.Е. Совместное нацеливание передачи сигналов HGF / cMET с ингибиторами MEK при метастатической увеальной меланоме. Mol Cancer Ther. 2017; 16: 516–28.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 95.

    Барат С., Бозко П., Чен Х, Схолта Т., Ханерт Ф., Гоце Дж., Малек Н.П., Вилкенс Л., Пленц Р.Р.Нацеливание на c-MET с помощью LY2801653 для лечения холангиокарциномы. Mol Carcinog. 2016; 55: 2037–50.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 96.

    Ван Дж., Ченг Дж. Ингибирование c-Met повышает химиочувствительность клеток рака яичников человека. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2017; 44: 79–87.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 97.

    Лю Х, Ван К., Ян Дж., Марандо К., Коблиш Х. К., Холл Л. М., Фридман Дж. С., Бехшад Е., Винн Р., Ли Й и др.Новый ингибитор киназ, INCB28060, блокирует c-MET-зависимую передачу сигналов, неопластическую активность и перекрестную связь с EGFR и HER-3. Clin Cancer Res. 2011; 17: 7127–38.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 98.

    Okusaka T, Aramaki T, Inaba Y, Nakamura S, Morimoto M, Moriguchi M, Sato T., Ikawa Y, Ikeda M, Furuse J. Исследование фазы I тивантиниба у японских пациентов с запущенной гепатоцеллюлярной карциномой: отличительные признаки фармакокинетические профили других солидных опухолей.Cancer Sci. 2015; 106: 611–7.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 99.

    Xiang Q, Zhen Z, Deng DY, Wang J, Chen Y, Li J, Zhang Y, Wang F, Chen N, Chen H, Chen Y. Тивантиниб вызывает задержку G2 / M и апоптоз за счет разрушения тубулина полимеризация при гепатоцеллюлярной карциноме. J Exp Clin Cancer Res. 2015; 34: 118.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

  • 100.

    Best J, Schotten C, Lohmann G, Gerken G, Dechene A. Тивантиниб для лечения гепатоцеллюлярной карциномы. Эксперт Opin Pharmacother. 2017; 18: 727–33.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 101.

    Секвист Л.В., фон Павел Дж., Гармей Э.Г., Акерли В.Л., Бруггер В., Феррари Д., Чен Ю., Коста ДБ, Гербер Д.Е., Орлов С. и др. Рандомизированное исследование фазы II эрлотиниба плюс тивантиниб по сравнению с эрлотинибом плюс плацебо при ранее леченном немелкоклеточном раке легкого.J Clin Oncol. 2011; 29: 3307–15.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 102.

    Йошиока Х., Адзума К., Ямамото Н., Такахаши Т., Нишио М., Катаками Н., Ан М.Дж., Хирасима Т., Маэмондо М., Ким С.В. и др. Рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование фазы III эрлотиниба с ингибитором c-Met тивантинибом или без него (ARQ 197) у азиатских пациентов с ранее леченными не плоскоклеточным немелкоклеточным раком легкого стадии IIIB / IV с эпидермальным заболеванием рецептор фактора роста (ВНИМАНИЕ).Энн Онкол. 2015; 26: 2066–72.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 103.

    Скальотти Г., фон Павел Дж., Новелло С., Рамлау Р., Фаваретто А., Барлези Ф, Акерли В., Орлов С., Санторо А., Спигель Д. и др. Фаза III многонационального рандомизированного двойного слепого плацебо-контролируемого исследования тивантиниба (ARQ 197) в сочетании с эрлотинибом в сравнении с одним только эрлотинибом у ранее леченных пациентов с местнораспространенным или метастатическим немелкоклеточным раком легкого.J Clin Oncol. 2015; 33: 2667–74.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 104.

    Пузанов И., Сосман Дж., Санторо А., Саиф М.В., Гофф Л., Дай Г.К., Зукали П., Минс-Пауэлл Дж. А., Ма В.В., Симонелли М. и др. Фаза 1 испытания тивантиниба в комбинации с сорафенибом у взрослых пациентов с запущенными солидными опухолями. Исследуйте новые наркотики. 2015; 33: 159–68.

    CAS Статья Google Scholar

  • 105.

    Klempner SJ, Borghei A, Hakimian B, Ali SM, Ou SI. Внутричерепная активность кабозантиниба в НМРЛ, положительном по экзону 14, с метастазами в головной мозг. J Thorac Oncol. 2017; 12: 152–6.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 106.

    Педерсен Л., Кристенсен Дж. Ф., Хойман П. Влияние физических упражнений на физиологию опухоли и метаболизм. Рак J. 2015; 21: 111–6.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 107.

    Corbet C, Feron O. Опухолевый ацидоз: от пассажира к сиденью водителя. Nat Rev Рак. 2017; 17: 577–93.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 108.

    Fan C, Tang Y, Wang J, Xiong F, Guo C, Wang Y, Zhang S, Gong Z, Wei F, Yang L, et al. Роль длинных некодирующих РНК в метаболизме глюкозы при раке. Молочный рак. 2017; 16: 130.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 109.

    Ван И, Мо И, Гонг З, Ян Х, Ян М., Чжан С., Сюн Ф, Сян Б., Чжоу М., Ляо Ц. и др. Циркулярные РНК при раке человека. Молочный рак. 2017; 16:25.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 110.

    Song Y, Li X, Zeng Z, Li Q, Gong Z, Liao Q, Li X, Chen P, Xiang B, Zhang W, et al. Вирус Эпштейна-Барра, кодируемый miR-BART11, способствует индуцированному воспалением канцерогенезу, воздействуя на FOXP1. Oncotarget. 2016; 7: 36783–99.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • MoMA или The Met - какой музей лучше?

    Многие туристы в Нью-Йорке в конце концов спрашивают: «МоМА или Метрополитен»?

    Что ж, если вы любитель искусства, мы рекомендуем вам посетить оба музея.

    Однако, если у вас нет времени, бюджета или желания посетить оба художественных музея, ознакомьтесь с нашим анализом МоМА и Метрополитена.

    MoMA - это то же самое, что The Met?

    Нет, МоМА и Метрополитен НЕ являются одной и той же достопримечательностью.

    MoMA - Музей современного искусства, специализирующийся на современном и современном искусстве.

    Между тем, Мет - крупнейший художественный музей в Соединенных Штатах, демонстрирующий более 5000 лет искусства, принадлежащего различным культурам и периодам.


    Наверх


    Расстояние между МоМА и Метрополитеном?

    MoMA и Метрополитен находятся всего в 2 милях (3,2 км) друг от друга.

    На самом деле, изучив один из них, вы можете пройтись по Центральному парку и добраться до другого - примерно за 35 минут.


    Наверх


    Метрополитен против МоМА

    Метрополитен-музей (Метрополитен) и Музей современного искусства (МоМА) - прекрасные музеи Нью-Йорка.

    Иногда из-за нехватки времени и желания приходится сравнивать и выбирать одно из двух.

    Хотя один из двух музеев нельзя назвать лучшим, мы можем сравнить два музея по разным параметрам.

    В этой статье сравниваются два музея в зависимости от здания, выставленного современного искусства, остальной коллекции произведений искусства, площади под открытым небом, часов работы, расположения и цен на билеты.

    Здания

    Их здания лучше всего символизируют разницу между MoMA и The Met Museum.

    Здание MoMA более новое и больше подходит для структуры Музея современного искусства.

    Открытый в 2004 году, музей настолько хорошо сливается с остальной частью города, что его трудно идентифицировать снаружи.

    Большая вывеска снаружи здания помогает туристам идентифицировать достопримечательность.

    В противоположность этому Метрополитен имеет гораздо большее здание площадью 2 миллиона квадратных футов.

    Фактически, это крупнейший художественный музей США.

    Музей Метрополитен, открытый в 1880 году, красив, колоссален и представляет собой произведение искусства.

    В здании снималось множество телешоу и фильмов, таких как «Хитч» и «Сплетницы».

    Это здание также является местом проведения Met Gala, Суперкубка моды, который проводится ежегодно в первый понедельник мая.

    Победитель : The Met

    Коллекция современного искусства

    Если вы поклонник современного искусства, MoMA должен быть вашим приоритетом.

    Музей полностью посвящен современному искусству и представляет всемирно известных современных художников, таких как Моне, Ван Гог, Пикассо и Уорхол.

    Вам также понравятся произведения современного искусства.

    В Met, напротив, больше классических произведений искусства со всего мира и разных эпох.

    В нем фантастическая коллекция произведений современного искусства, но не так хорошо, как в МоМА, который специализируется на этом.

    Победитель : MoMA

    Общая коллекция произведений искусства

    MoMA полностью фокусируется на современном искусстве, поэтому в выставках меньше разнообразия.

    Здесь представлены достойные похвалы современные произведения искусства, способные очаровать энтузиастов современного искусства.

    Разнообразие экспонатов Метрополитен-музей делает его лучшим вариантом для 360-градусного знакомства с искусством.

    Вы найдете произведения современного и традиционного искусства в одном месте.

    У них есть коллекции картин и скульптур 20-го века и египетские экспонаты, включая целый египетский храм, прекрасную галерею доспехов, предметы мебели, декоративные художественные изделия, древние музыкальные инструменты и статуи из многих периодов и многих культур.

    Таким образом, он является победителем благодаря разнообразию предлагаемых товаров.

    Победитель : The Met

    Открытое пространство

    Открытое пространство является важным аспектом зданий Манхэттена, и оба музея вложили средства в тихое и красивое открытое пространство.

    МоМА известен своим садом скульптур, который открыт круглый год независимо от погодных условий.

    Сад скульптур в МоМА. Изображение: Moma.org

    В Met Museum есть сад на крыше, в котором каждый год устраиваются разные художественные выставки.

    Он закрыт по понедельникам и открыт с 10:00 до 16:30 в течение всей недели, кроме пятницы и субботы, когда он закрывается в 20:00.

    На крыше также есть бар Martini, который открыт только в пятницу и субботу с 17:30 до 20:00.

    Но печально то, что на крышу можно попасть только в более теплую погоду.

    Но Met Museum в этом плане повезло больше, чем MoMA, так как из него открывается вид на Центральный парк, который выглядит завораживающе.

    Победитель : The Met

    Часы работы

    Бывают моменты, когда вам приходится выбирать между MoMA или Met из-за временных ограничений.

    MoMA открыт всю неделю с 10:30 до 17:30.

    В летний сезон он работает до 21:00 в четверг и субботу.

    Таким образом, летом здесь лучше, чем в Met Museum.

    Метрополитен открыт с 10:00 до 17:30 с воскресенья по четверг, а по пятницам и субботам - с 10:00 до 21:00.

    Таким образом, за исключением лета, здесь часы работы лучше, чем в MoMA в течение всего года.

    Лучше идти в любой из музеев утром, так как к полудню там уже многолюдно.

    Из-за меньшего размера MoMA все время кажется более многолюдным, чем The Met.

    Победитель : Галстук

    Цена билетов

    И билеты MoMA, и билеты The Met имеют одинаковую цену.

    В Met Museum жители Нью-Йорка могут выбрать цену, которую они хотят заплатить, чтобы войти в музей.

    Да, верно, когда местные жители покупают билет в музей Метрополитена, они могут назвать свою цену.

    Этот бонус «плати сколько можешь» распространяется на жителей Нью-Йорка и студентов из Нью-Йорка, Нью-Джерси и Коннектикута.

    Бонус не распространяется на туристов со стороны, они должны платить обычную стоимость билета.

    Детям до 12 лет вход бесплатный.

    Каждый человек имеет фиксированную плату за вход в МоМА, и дети до 16 лет могут входить бесплатно.

    С 1 июля по 2 сентября MoMA предлагает бесплатный вход с 16:00 до 20:00.

    Чтобы воспользоваться скидкой, рекомендуется в пятницу ехать пораньше, потому что это привлекает толпу.

    Победитель : Галстук

    Примечание: New York Pass включает в себя посещение более 100 достопримечательностей Нью-Йорка, и MoMA и Met являются его частью. Купить


    Наверх


    Met Museum или MoMA - что лучше?

    Сравнив их по различным параметрам, вы, должно быть, уже поняли, что MoMA и Met похожи на мел и сыр.

    Не хотим брать подставка, на которой лучше, поскольку вы не оставляете нам выбора вот наше предложение, основанное на ситуации.

    В зависимости от вашего интереса

    МоМА - это центр современного искусства.

    Его сфера деятельности - фотография, архитектура и искусство современных художников.

    Если вас интересуют только современные произведения искусства, то есть вещи, созданные после 1900 года, и вас не интересуют другие элементы искусства, MoMA лучше всего для вас.Заказать билеты в MoMA

    В Метрополитене собраны как произведения современного искусства, так и старинные произведения старых мастеров и древности незапамятных времен.

    Он содержит небольшую коллекцию произведений современного искусства и не фокусируется на них в той мере, в какой МоМА.

    Так что, если вас больше интересуют разнообразные экспонаты, а не только современное искусство, Метрополитен-музей - это место для вас. Заказ билетов в The Met

    В зависимости от того, сколько времени у вас есть

    MoMA меньше по размеру и занимает около трех часов, чтобы полностью изучить его.

    С другой стороны, Met Museum намного больше и может держать вас в курсе более пяти часов.

    Если у вас мало времени, но вы хотите получить удовольствие от посещения музея в Нью-Йорке, мы предлагаем вам выбрать MoMA.

    И оставьте The Met для вашего следующего визита.

    Популярные достопримечательности Нью-Йорка

    # Статуя Свободы
    # Эмпайр-стейт-билдинг
    # Вершина скалы
    # Метрополитен-музей
    # One World Observatory
    # 9/11 Мемориал и музей
    # Музей современного искусства
    # Intrepid Museum
    # Музей Гуггенхайма
    # Вертолетный тур по Нью-Йорку
    # BlueMan Group NYC
    # Круиз с ужином Spirit of New York

    ^ Наверх

    Сигнализация с участием MET и FAK поддерживает деление клеток независимо от активности клеточного цикла -регулирующие киназы CDK4 / 6

    Скрининг определяет белки, необходимые для активации CDK2 в CDK4 / 6-ингибированных клетках

    Для оценки активации CDK2 в клетках, подвергнутых воздействию CDK4 / 6is, мы использовали клеточный репортер CDK2 (GFP-PSLD), где зеленый флуоресцентный белок (GFP) слит с CDK2-регулируемым фосфорилированным доменом субклеточной локализации (PSLD) ДНК-геликазы B человека [25].Фосфорилирование PSLD с помощью CDK2 экспонирует ядерную экспортную последовательность, инициируя ядерное исключение слитого белка GFP и накопление в цитоплазме (Fig. 1a). Мы использовали клетки колоректальной карциномы человека HCT116 (HCT116), которые стабильно экспрессируют GFP-PSLD (HCT116-PSLD) [26]. Обработка HCT116-PSLD миРНК, нацеленной на CDK2, или пальбоциклибом CDK4 / 6i, значительно увеличивала фракцию клеток с преимущественно ядерной флуоресценцией (соотношение ядерной: цитоплазматической (ядер / цито) флуоресценции> 1.5), что согласуется с зависимостью от локализации репортера на CDK2 и активации CDK4 / 6 (Supplementary Fig. 1a-c). Однако, хотя лечение палбоциклибом увеличивало процент клеток с локализованным в ядре репортером CDK2, значительная часть клеток с потерей активности CDK4 / 6 обнаруживалась по отсутствию RB1, фосфорилированного по сайту селективного фосфорилирования CDK4 / 6 Ser780 (pRB1 S780 ) [27], продолжал содержать репортер с преобладающей цитоплазматической локализацией (дополнительный рис.1г, д). Это указывает на независимую от CDK4 / 6 активацию CDK2. Неожиданно мы наблюдали, что устранение опухолевого супрессора TP53 снижает контроль CDK2 с помощью палбоциклиба, даже несмотря на то, что клетки оставались чувствительными к ингибированию CDK4 / 6, на что указывает снижение количества клеток, содержащих pRB1 S780 (дополнительные рисунки 1f и 1g). .

    Рис. 1

    Скрининг белков, разрешающих активацию CDK2 в клетках с ингибированием CDK4 / 6. a Схема, изображающая функционирование репортера CDK2 GFP-PSLD.Модульная структура репортера, взаимосвязь между субклеточным распределением GFP и фазой клеточного цикла, а также репрезентативное изображение отдельного HCT116-PSLD с низкой (GFP-PSLD nuc / cyto> 1,5) или высокой (GFP-PSLD nuc / cyto <1,5) активностью CDK2 Показано. HDHB, ДНК-геликаза B человека; NES, ядерная экспортная последовательность. b Схема экрана и процедура идентификации попадания. c Z-оценка для пулов миРНК на экране. Показаны результаты для невозмущенных (siNT) и TP53-возмущенных (siTP53) состояний.Точки данных представляют собой среднее значение n = 3 независимых повтора; Пулы миРНК с Z-оценкой> 2 отмечены красным. d Иерархическая кластеризация совпадений на основе средних ( n = 3) значений индекса чувствительности (SI). Цвета обозначают характер взаимодействия между пулом миРНК и пальбоциклибом: красный - синергетический; белый, добавка; синий, антагонистический. Гены-мишени миРНК справа. (Относится к дополнительному рисунку 1)

    Чтобы идентифицировать передачу сигналов, которая разрешает независимую от CDK4 / 6 активацию CDK2, мы трансфицировали HCT116-PSLD библиотекой пулов малой интерферирующей РНК (миРНК), нацеленной на киназы и релевантные киназе компоненты, и оценили способность палбоциклиба сдерживать активацию CDK2 в этих условиях (рис.1б). Поскольку мы наблюдали ослабление контроля CDK2 после удаления TP53 и поскольку функциональная потеря TP53 является частой при раке, мы включили руку в скрининг, где мы скомпрометировали экспрессию TP53, используя миРНК TP53 , нацеленную на .

    Чтобы идентифицировать пулы миРНК, которые избирательно снижали активность CDK2 при лечении палбоциклибом, мы вычислили индекс чувствительности (SI), который количественно определяет разницу между ожидаемыми комбинированными и измеренными эффектами двух обработок [28, 29], в данном случае эффекты специфических миРНК и эффект ингибирования CDK4 / 6 на активность CDK2.Ранжируя значения SI, рассчитанные с использованием статистики Z-score (рис. 1c), мы выбрали пулы миРНК с Z-баллами> 2 для дальнейшего анализа, получив 30 пулов, которые выборочно снижали CDK2 в сочетании с ингибированием CDK4 / 6 в клетках HCT116-PSLD, и 23 в HCT116-PSLD с нарушенной экспрессией TP53 .

    Большинство пулов миРНК, идентифицированных в TP53 -скомпрометированных клетках HCT116-PSLD, снижали активность CDK2 также в HCT116-PSLD. Напротив, менее половины идентифицированных в HCT116-PSLD снижало активность CDK2 в клетках, модифицированных TP53 (рис.1г). Эти результаты указывают на различия в регуляции CDK2 в TP53 -нормальном и TP53 -нарушенном фонах, но в то же время подчеркивают возможность усиления зависимости активации CDK2 от CDK4 / 6 в клетках, независимо от TP53. Статус .

    Передача сигналов MET / FAK необходима для активации CDK2 в CDK4 / 6-ингибированных клетках

    Чтобы найти аннотированные пути, чрезмерно представленные среди идентифицированных мишеней siRNA, мы использовали инструмент MetaCore TM GeneGO (дополнительные таблицы 1 и 2).Это показало, что наиболее значительно обогащен хорошо связанный концентратор, включающий рецептор протоонкогена / гепатоцитов (MET) и тесно связанный рецептор фактора роста макрофагов (MST1R / RON), а также рецептор 3 фактора роста фибробластов (FGFR3) и их общие нижестоящие мишени передачи сигналов, focal adhesion kinases (FAK) PTK2 и PTK2B (Fig. 2a).

    Рис. 2

    Передача сигналов с участием MET разрешает активацию CDK2 в клетках с ингибированием CDK4 / 6. a MetaCore TM Анализ GeneGO идентифицирует сигнальную сеть, использующую MET, которая чрезмерно представлена ​​совпадениями.Типы взаимодействия: P, фосфорилирование; Б, переплет; белки, нацеленные на скрининг, идентифицировали пулы миРНК синим цветом. b , c Проверка совпадения с использованием индивидуальных миРНК ( b ) или фармакологических ингибиторов MET / MST1R (кризотиниб или форетиниб) или PTK2 / 2B (PDN-1186 или дефактиниб) ( c ). Данные отражают оценку SI, относящуюся к потере активности CDK2 в комбинации с ингибированием CDK4 / 6 с использованием палбоциклиба, определенную с использованием локализации GFP-PSLD. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для n = 3 независимых повтора. d , e Анализ эффекта концентрации, отражающий изменение фракции клеток с низкой активностью CDK4 / 6, оцененное с помощью автоматизированного микроскопического анализа клеток, иммуноокрашенных на pRB1 S780 ( d ) или с низкой активностью CDK2, оценено на основе локализации GFP-PSLD ( и ) после индивидуального или комбинированного ингибирования CDK4 / 6 с использованием палбоциклиба и МЕТ с использованием кризотиниба. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех независимых повторов. **** п ≤ 0.0001, нс p > 0,05, односторонний дисперсионный анализ, сравнивающий эффекты различных концентраций против носителя или сравнение одного пальбоциклиба с палбоциклибом плюс кризотиниб ( d ) и сравнение одного пальбоциклиба или кризотиниба с палбоциклибом эйзотиниб () . f График значений CI, рассчитанный на основе данных в ( e ). F a = затронутая фракция

    Две или более отдельных siRNA, нацеленных на MET, MST1R, PTK2 или PTK2B, синергетически увеличивают процент клеток с локализованным в ядре PSLD-GFP после ингибирования CDK4 / 6 (рис.2b), подтверждая участие членов семейств MET и FAK в активации CDK4 / 6-независимой активации CDK2 в клетках. Комбинированное использование миРНК MET и MST1R или PTK2 и PTK2B siRNA не улучшило результат, что предполагает независимый, ограничивающий скорость вклад отдельных киназ семейств MET и FAK в этом контексте. Примечательно, что обработка химическими ингибиторами, нацеленными на киназы семейства MET или FAK, синергетически снижает активность CDK2 в сочетании с палбоциклибом (рис.2в). Активность сетевых компонентов FGFR3, SRC и JAK не подтверждается множественными олигонуклеотидами (рис. 2b). Следовательно, участие этих компонентов в активации CDK4 / 6-независимой активации CDK2 не может быть определенным.

    Чтобы оценить, позволяет ли ингибирование MET контролировать CDK2 за счет повышения эффективности CDK4 / 6is по контролю CDK4 / 6, мы оценили потерю pRB1 S780 (рис. 2d) в HCT116-PSLD, обработанном индивидуальными и комбинированными ингибиторами. Как и ожидалось, мы наблюдали значительное увеличение фракции pRB1 S780 -отрицательных клеток после ингибирования CDK4 / 6.Напротив, ингибирование MET не приводило к значительному увеличению фракции pRB1 S780 -отрицательных клеток. Важно отметить, что комбинированное ингибирование CDK4 / 6 и MET было не более эффективным для повышения фракции pRB1 S780 -отрицательных клеток, чем ингибирование только CDK4 / 6 при любой испытанной концентрации. Тем не менее, и это согласуется с нашими более ранними результатами, комбинированное ингибирование CDK4 / 6 и MET привело к значительно большему снижению количества клеток с активным CDK2, чем обработка любым ингибитором по отдельности (рис.2д). Анализ Chou-Talalay «концентрация-эффект» [30] выявил устойчивое синергетическое взаимодействие между ингибированием MET и CDK4 / 6 в направлении снижения активности CDK2, возвращая значения индекса комбинации (CI) значительно ниже 1 в исследуемом диапазоне концентраций (рис. 2f), независимо от статуса TP53 . Следовательно, ингибирование МЕТ взаимодействует с палбоциклибом для контроля активации CDK2, но не увеличивает способность палбоциклиба подавлять активность CDK4 / 6.

    Комбинированное ингибирование MET и CDK4 / 6 синергетически влияет на судьбу опухолевых клеток in vitro и снижает рост опухоли in vivo

    Поскольку ингибирование MET синергетично с ингибированием CDK4 / 6, что позволяет контролировать CDK2, мы проверили, будет ли это лечение также синергетически обеспечивать другие ответы, связанные с ингибированием CDK4 / 6.Ингибирование CDK4 / 6 известно из-за его способности запускать постоянный выход из клеточного цикла, что, как считается, лежит в основе его противоопухолевой активности [31]. Чтобы оценить, усиливает ли ингибирование MET постоянный выход из клеточного цикла при ингибировании CDK4 / 6, мы подвергали клетки действию ингибиторов в течение 5 дней подряд, а затем количественно оценивали их способность образовывать колонии, высевая равное количество живых клеток в среду, не содержащую ингибиторов (рис. 3). Первоначально мы измерили ответ HCT116, используя два химически неродственных ингибитора CDK4 / 6, палбоциклиб и абемациклиб, и два химически различных ингибитора киназ семейства MET, кризотиниб и форетиниб (рис.3a – d) в соответствии с передовой практикой [32].

    Рис. 3

    CDK4 / 6 и METis взаимодействуют для прекращения воспроизводства клеток. a – d Клоногенная активность в HCT116 определяется через 120 часов после воздействия ингибитора ингибиторами CDK4 / 6 (пальбоциклиб или абермациклиб) или МЕТ (кризотиниб или форетиниб). Показаны данные для HCT116 TP53 WT и TP53 - / - . Биомаркеры ответа на ингибитор pRB1 S780 (для активности CDK4 / 6) и pMET Y1234 / 5 (для активности MET) ( a ), определенные через 48 часов после добавления ингибитора.GAPDH служил контролем загрузки. b - f Клоногенная активность определена через 120 часов после воздействия ингибитора в MCF7 и A549. Показаны примерные исходные данные ( b , e ) и количественная оценка клоногенной выживаемости (среднее ± стандартное отклонение, n = 3 независимых повтора) ( c , d , f ). Палбоциклиб и кризотиниб использовали в концентрации 450 нМ, абемациклиб и форетиниб в концентрации 225 нМ. ††† : SI ≥ 0,25 (высокая степень синергизма), †† : 0.25> SI ≥ 0,1 (синергетический), **** p 0,0001, однофакторный дисперсионный анализ

    Комбинаторное лечение значительно усиливало снижение роста колоний по сравнению с индивидуальными ингибиторами ( p < 0,01, два -way ANOVA). Идентичные результаты были получены для HCT116 с геномной делецией гена TP53 ( TP53 - / - ) [33] или изогенного HCT116 с функциональным TP53 ( TP53 WT ) и высоко синергетическим (SI ≥ 0.25) или синергетические (SI> 0,1) взаимодействия наблюдались независимо от хемотипа ингибитора или партнера по комбинации (рис. 3b – d). Анализ биомаркеров через 24 часа подтвердил, что ингибиторы соответствующим образом модулируют свои соответствующие мишени (рис. 3а). Таким образом, pRB1 S780 снижалось там, где использовались CDK4 / 6is, тогда как аутофосфорилированный на Tyr1234 / 1235 МЕТ (pMET Y1234 / 5 ) снижался в клетках, подвергнутых действию METis. Как отмечалось ранее, ингибирование MET не влияло на фосфорилирование pRB1 S780 , а ингибирование CDK4 / 6 не влияло на состояние активации MET.Взаимодействие между ингибированием MET и ингибированием CDK4 / 6 в снижении способности к образованию колоний также наблюдалось в клеточных линиях, полученных от других типов рака, а именно в клетках, полученных из карциномы молочной железы человека MCF7, положительных по эстрогену / прогестерону (MCF7), и в KRAS. -мутированные клетки A549, происходящие от аденокарциномы легких человека (A549) (фиг. 3e, f).

    Комбинированное ингибирование MET и CDK4 / 6 также синергетически приводит к потере экспрессии Ki-67 (рис. 4a – c и дополнительный рис. 2). Потеря Ki-67 указывает на выход из клеточного цикла [34] и предсказывает ответ на ингибирование CDK4 / 6 в доклинических моделях [7].Комбинированное ингибирование CDK4 / 6 и MET в течение 5 дней значительно и совместно увеличивало процент HCT116, отрицательных по Ki-67, по сравнению с лечением отдельными агентами - независимо от статуса TP53 (рис. 4a) - давая значения CI значительно ниже 1 во всем протестированном диапазоне концентраций (дополнительный рис. 2а).

    Фиг. 4

    MET и CDK4 / 6 взаимодействуют, способствуя выходу из клеточного цикла и ответу опухоли in vivo. a Анализ эффекта концентрации, отображающий фракцию HCT116 с низким значением Ki-67, определенный с использованием автоматизированного микроскопического анализа клеток, окрашенных антителом Ki-67 MIB1.Клетки обрабатывали ингибиторами в течение 96 ч. Данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение для n = 3 независимых повтора. b , c Влияние ингибирования CDK4 / 6 и МЕТ на индекс мечения Ki-67 на панели линий раковых клеток. Клетки обрабатывали палбоциклибом и / или кризотинибом в течение 96 часов. Показаны расчет значения CI ( b ) и примерные результаты ( c ) на основе двух или более независимых повторов, выполняемых в двух экземплярах, каждый из которых. CI 50 , CI 75 и CI 90 обозначают значения CI при концентрациях с 50, 75 или 90% клеток, отвечающих потерей Ki-67, соответственно, na = фракционные ответы, недостижимые в пределах тестируемого диапазона концентраций ингибитора.Статус мутации ключевых онкогенных факторов указывается для каждой линии раковых клеток. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для n = 2 независимых повтора, каждый в двух повторностях. d Анализ эффекта концентрации, отражающий фракционное увеличение клеток с высоким содержанием SA-β-gal, оцененное с помощью автоматической микроскопии клеток, прореагировавших с флуоресцентным субстратом C 12 FDG. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для n = 3 независимых повтора, каждое в трех повторностях. e HCT116 объемы ксенотрансплантата опухоли относительно дня 0 у контрольных мышей и мышей, получавших ингибитор (среднее ± стандартное отклонение, n = 10). f Концентрация ингибиторов в ткани ксенотрансплантата опухоли (среднее ± стандартное отклонение, n = 3 опухоли). г Модуляция биомаркеров, указывающих на активность CDK4 / 6 (pRB1 S780 ) и MET (pMET Y1234 / 5 ) в ткани ксенотрансплантата опухоли (среднее ± стандартное отклонение, n = 3 опухоли). ** p ≤ 0,01, *** p ≤ 0,001 и **** p ≤ 0,0001; Двусторонний дисперсионный анализ, сравнивающий размер эффекта одного агента с эффектом комбинации ( a , c , d ) или двусторонний непарный тест Стьюдента t ( e , f , г ).(Относится к дополнительному рисунку 2 и дополнительному рисунку 3)

    Потеря Ki-67 в отдельных клетках коррелировала с ядерной локализацией репортера GFP-PSLD в тех же клетках (дополнительный рисунок 2b, c), подтверждая это снижение Активность CDK2 и потеря Ki-67 механистически связаны. Кроме того, различные хемотипы MET и CDK4 / 6i синергизируют для снижения фракции Ki-67-положительных клеток в обработанных популяциях (дополнительный рис. 2d), что указывает на то, что наблюдаемый эффект является устойчивым и включает в себя ингибирование MET и CDK4 / 6 на мишени.

    Важно отметить, что ингибирование MET и CDK4 / 6 синергетически снижает экспрессию Ki-67 в наборе линий раковых клеток с различными тканями происхождения и профилями генетических драйверов (рис. 4b, c). Анализ «концентрация-эффект» подтвердил синергетическое взаимодействие для 10 из 12 протестированных линий. Заметными исключениями были две линии с мутацией RB1, линия остеосаркомы SAOS2 и линия клеток рака шейки матки C-33A, где комбинированное лечение имело аддитивный или менее аддитивный эффект (рис. 4b, c), что согласуется с представлением о том, что RB1 является критически важным. нижестоящий эффектор CDK4 / 6, и эта потеря RB1 делает клетки невосприимчивыми к CDK4 / 6is.Таким образом, комбинированное ингибирование МЕТ и CDK4 / 6 действует синергично для гистио- и генотипов рака. Отсутствие синергизма в фонах с мутацией RB1 определяет активность RB1 как критический компонент, необходимый для этого синергетического взаимодействия.

    Мы также оценили, усиливает ли комбинированное ингибирование MET и CDK4 / 6 старение или способствует его старению путем количественной оценки связанной со старением β-галактозидазы (SA-β-gal) в клетках. CDK4 / 6 вызывают клеточное старение, которое, как полагают, лежит в основе потери клоногенной активности, которую они вызывают [3, 31, 35].Используя C 12 FDG, субстрат β-галактозидазы с зеленым флуоресцентным продуктом реакции, допускающий автоматический количественный анализ, мы наблюдали явное увеличение клеток с флуоресценцией C 12 FDG с характерным распределением в околоядерной области после обработки комбинацией ингибиторов. (Дополнительный рис. 3а, б). Клетки, обработанные комбинацией, показали дополнительные изменения, связанные с клеточным старением, включая уплощенную форму, увеличенные ядра и увеличенный размер клеток.Автоматический количественный анализ подтвердил зависящее от концентрации увеличение фракции клеток с перинуклеарной зеленой флуоресценцией выше исходного уровня после комбинированной, по сравнению с обработкой одним агентом METis и CDK4 / 6is (рис. 4d), с анализом концентрация-эффект, подтверждающим надежную синергетическое взаимодействие для экспрессии этого маркера старения (дополнительный рис. 3c).

    Наконец, мы оценили активность пролиферации клеток с использованием клеток, модифицированных для экспрессии ядерного маркера GFP-h3B, для отслеживания деления с помощью покадровой микроскопии (дополнительный рис.3d – i). Эти эксперименты выявили синергетическое снижение активности дупликации при комбинированном ингибировании МЕТ и CDK4 / 6 - независимо от статуса TP53 .

    Вместе эти результаты подтверждают мнение о том, что ингибирование MET синергетически увеличивает известные клеточные ответы, связанные с ингибированием CDK4 / 6. Напротив, результаты подтверждают роль MET в предотвращении этих ответов в клетках, обработанных CDK4 / 6is, включая ответы, которые предсказывают противоопухолевый ответ на ингибирование CDK4 / 6 in vivo.

    Чтобы проверить, является ли ингибирование CDK4 / 6 в сочетании с ингибированием MET возможной стратегией лечения рака in vivo, мы оценили комбинированный эффект кризотиниба и палбоциклиба на рост ксенотрансплантатов опухоли человека у бестимусных мышей. Комбинированное ежедневное введение кризотиниба и палбоциклиба в дозе 100 мг / кг (перорально) хорошо переносилось мышами (дополнительный рис. 3k), что приводило к устойчивому накоплению агентов в опухолевой ткани (рис. 4f) и модуляции pRB1 S780 и pMET . Y1234 / 5 фармакодинамические биомаркеры в течение 24-часового периода (рис.4г).

    Используя этот график, мы лечили мышей, несущих ксенотрансплантаты опухоли HCT116 TP53 - / - (рис. 4e), индивидуальными ингибиторами или их комбинацией в течение 8 дней, а затем наблюдали за ними еще 5 дней, когда опухоли в контроле группа достигла предопределенного размера. Этот анализ подтвердил превосходную эффективность комбинации со статистически значимым снижением опухолевой нагрузки по сравнению с лечением одним агентом в конце периода наблюдения ( p = 0.005 против палбоциклиба и p = 0,006 против кризотиниба, тест Стьюдента t ).

    Вместе эти результаты обеспечивают доказательство того, что активность МЕТ составляет механизм устойчивости in vitro и in vivo, снижая ответ опухолевых клеток на ингибирование CDK4 / 6. Важно отметить, что наши результаты показывают, что комбинированное фармакологическое ингибирование МЕТ и CDK4 / 6 является осуществимой стратегией, способной улучшить ингибирование роста опухоли у мышей, что указывает на потенциал этой комбинации для клинического использования.

    Синергетическое ингибирование CDK2 с помощью MET и CDK4 / 6is включает p21

    CIP1

    . Чтобы определить механизм, с помощью которого синергетично ингибирование MET и CDK4 / 6, мы охарактеризовали активность и состав комплекса CDK2 в клетках, обработанных ингибитором, с использованием иммунопреципитации. Эти эксперименты подтвердили значительное снижение активности CDK2 при комбинированном ингибировании MET и CDK4 / 6, определяемое способностью иммунопреципитатов анти-CDK2 вызывать фосфорилирование субстрата (GST-RB 763-928) in vitro (рис.5a, b, дополнительный рис. 4a – d).

    Рис. 5

    Совместное управление CDK2 с помощью MET и CDK4 / 6i включает p21 CIP1 . a - d Характеристика комплекса CDK2 с использованием иммунопреципитации против CDK2. Показаны данные для HCT116, MCF7 и A549. Клетки обрабатывали 500 нМ ингибиторов в течение 24 часов (HCT116) или 48 часов (MCF7 и A549). Репрезентативный анализ киназы иммунопреципитации ( a ), отображающий in vitro-фосфорилированный субстрат GST-pRB 763–928 (p-субстрат), сообщающий об активности CDK2, общем количестве субстрата (GST) (вверху) и количестве совместно осажденного p21 CIP1 , общий и фосфорилированный CDK2 (pCDK2 Y15 , pCDK2 T160 ) и циклин E (CCNE1) в соответствующих иммунопреципитациях (ниже).Количественное определение (среднее ± стандартное отклонение, n > 2 независимых повтора) p-субстрата ( b ) и соосажденного p21 CIP1 ( c ) относительно уровней в клетках, обработанных носителем, и иммуноблоты входящего лизата ( d ) оценка биомаркеров pRB1 S780 (для активности CDK4 / 6) и pMET Y1234 / 5 (для активности MET) для образцов, проанализированных на этом рисунке. * p ≤ 0,05, ** p ≤ 0,01, *** p ≤ 0,01 и **** p ≤ 0.0001, двусторонний дисперсионный анализ, оценивающий размер эффекта одного агента с размером эффекта их комбинации, a HCT116, b MCF7 и c A549. ††† SI ≥ 0,25 (синергетический) рассчитано с использованием средних значений. и Репрезентативные иммуноблоты, оценивающие уровни CDKI и SKP2 семейства CIP / KIP в клеточных лизатах после обработки клеток 500 нМ ингибиторами. f Активность CDK2, оцененная с использованием локализации GST-PSLD, в HCT116 после трансфекции siRNA, нацеленной на белки семейства CIP / KIP с или без siRNA, нацеленной на TP53 , с последующей обработкой 500 нМ ингибиторами в течение 24 часов (среднее ± SD, n = 3 независимых повтора). нс p > 0,05, ** p ≤ 0,01, *** p ≤ 0,001, двухфакторный дисперсионный анализ, оценивающий размер эффекта одного агента по сравнению с размером эффекта их комбинации. a невозмущенный (siNT), b TP53-возмущенный (siTP53). г Иммуноблот, документирующий потерю белков семейства CIP / KIP после трансфекции siRNA. ч. Активность CDK2, оцененная с использованием локализации GST-PSLD, в HCT116 после трансфекции siRNA, нацеленной на белки семейства RB или TP53.Данные отображают среднее значение ± стандартное отклонение для трех независимых повторов, нс p > 0,05, *** p ≤ 0,001, двухфакторный дисперсионный анализ, оценивающий размер эффекта лечения одним агентом по сравнению с размером эффекта их комбинации. a невозмущенный (siNT), b возмущенный TP53 (siTP53), c возмущенный RB (siRB1 / L1 / L2). GAPDH ( d , e , g ) служил в качестве контроля загрузки. (Относится к дополнительным рис. 4 и 5)

    Снижение активности CDK2 не сопровождалось уменьшением количества циклина E1 (CCNE1) или изменением фосфорилирования CDK2 по Tyr15 (pCDK2 Y15 ) или Thr160. (pCDK2 T160 ), которые, как известно, обеспечивают отрицательную и положительную регуляцию активности CDK2 соответственно [36] (рис.5а). Однако наблюдалось значительное увеличение количества белка-ингибитора CDK (CDKI) p21 CIP1 в преципитатах из клеток, обработанных комбинированным MET и CDK4 / 6i, по сравнению с клетками, обработанными одним агентом или носителем. Снижение активности CDK2 и повышенное присутствие p21 CIP1 в преципитатах анти-CDK2 постоянно наблюдались во множественных линиях опухолевых клеток, подверженных комбинированному ингибированию MET и CDK4 (фиг. 5a, c). Анализ вводимых лизатов выявил потерю pRB1 S780 в образцах с ингибированием CDK4 / 6 и потерю pMET Y1234 / 5 в образцах с ингибированием MET (рис.5d), подтверждая активность одного агента и подтверждая, что эти проксимальные биомаркеры и пути независимо модулируются соответствующими ингибиторами, независимо от клеточного фона. Практически идентичные результаты были получены при иммунопреципитации с использованием антитела к циклину E, активирующему CDK2 (дополнительный рис. 4e-m). Вместе эти результаты подтверждают, что снижение активности CDK2 является кооперативным событием, вызванным комбинированным ингибированием CDK4 / 6 и MET. Они также идентифицируют связывание p21 CIP1 с комплексом CDK2 как потенциальную причину, лежащую в основе кооперативного взаимодействия этих ингибиторов.

    Чтобы оценить, связана ли повышенная ассоциация p21 CIP1 с комплексом CDK2 с повышенным содержанием p21 CIP1 , мы проанализировали лизат из обработанных клеток с помощью иммуноблоттинга (рис. 5d). Постепенное увеличение численности p21 CIP1 наблюдалось между 24 и 48 часами после комбинированного лечения (рис. 5e, с количественной оценкой на дополнительном рис. 5a). Это увеличение p21 CIP1 было очевидным в TP53 - / - HCT116, что свидетельствует о том, что повышающая регуляция p21 CIP1 , известной мишени, транскрипционно активируемой TP53, не зависит от TP53.Мы также исследовали численность двух других членов семейства CIP / KIP CDKI, выявив увеличение p27 KIP1 через 48 часов, но не в более ранние сроки. Никаких изменений в уровнях p57 KIP2 не наблюдалось (рис. 5e и дополнительный рис. 5a).

    Далее мы оценили уровень субъединицы распознавания субстрата убиквитинлигазы SKP1-cullin-F-box (SKP2), участвующей в регуляции стабильности белков семейства CIP / KIP. Четкое снижение SKP2, обнаруживаемое через 24 часа и выраженное через 48 часов, наблюдалось после комбинированного ингибирования MET и CDK4 / 6 по сравнению с HCT116, обработанным носителем (рис.5e и дополнительный рис. 5a). На количество SKP2 не влияло только ингибирование CDK4 / 6 или MET. Комбинированное ингибирование MET и CDK4 / 6 привело к усилению регуляции p21 CIP1 и потере SKP2 во множестве других клеточных фонов (фиг. 5e, с количественной оценкой на дополнительных фиг. 5b, 5c), что указывает на то, что этот ответ широко наблюдается. Вместе эти эксперименты показывают, что передача сигналов через MET и CDK4 / 6 действует избыточно, подавляя CDKI p21 CIP1 и p27 KIP1 и повышая регуляцию их регулятора SKP2, что, в свою очередь, дает возможное объяснение того, почему комбинированное ингибирование MET и CDK4 / 6 требуется для ингибирования CDK2 и способности пролиферации клеток.

    Чтобы оценить, участвуют ли члены семейства CIP / KIP в синергетическом контроле CDK2, мы истощили эти CDKI по отдельности или в комбинации с использованием siRNA и оценили влияние этого на контроль CDK2, используя локализацию репортера GFP-PSLD (рис. 5е). Эти эксперименты положительно идентифицировали p21 CIP1 как критический механистический компонент в контроле CDK2 путем комбинированного ингибирования MET- и CDK4 / 6. Таким образом, трансфекция клеток siRNA, нацеленная на CDKN1A (которая кодирует p21 CIP1 ), последовательно предотвращала контроль CDK2 с помощью комбинации.Нацеливание миРНК на CDKN1B (кодирующее p27 KIP1 ) и CDKN1C (кодирующее p57 KIP2 ) по отдельности или в комбинации не имело эффекта, несмотря на доказательства того, что siRNA эффективно истощили соответствующие CDKI (фиг. 5g). Сходные результаты были получены в клетках, одновременно трансфицированных siRNA TP53 , что указывает на критическую роль p21 CIP1 , независимо от статуса TP53 .

    Регуляция CDK2 комбинацией MET и CDK4 / 6i также предотвращалась после потери белков семейства RB, RB1, RBL1 и RBL2 (рис.5h), что согласуется с известной резистентностью к CDK4 / 6is клеток с функциональной потерей RB и указывает на критическую механистическую роль функции белка RB в контроле CDK2 путем комбинированного ингибирования MET и CDK4 / 6.

    Конститутивная активность FAK отменяет кооперацию между METis и CDK4 / 6is

    Наш скрининг siRNA идентифицировал киназы семейства FAK PTK2 и PTK2B, которые являются известными эффекторами MET, в качестве кандидатов, которые способствуют CDK4 / 6-независимой активации CDK2. Следовательно, мы искали доказательства того, участвует ли передача сигналов через эти киназы в CDK4 / 6-независимой активации CDK2 с помощью MET и может ли дополнительная передача сигналов, задействованных в MET, играть роль.MET и его близкий родственник MST1R соединяются с множеством эффекторных путей, среди них RAS / RAF / ERK, PI3K / AKT, SRC и STAT3, которые они активируют в дополнение к передаче сигналов с участием семейства FAK / PTK (дополнительный рис. 6a).

    При эффективном блокировании аутофосфорилирования МЕТ в каталитической области (pMET Y1234 / 5 ) и в многофункциональном стыковочном сайте MET (pMET Y1349 ) и, кроме того, аутофосфорилирование MST1R по Tyr1353 (pMST1R Supplementary Y1353 ) .6b), обработка HCT116 одним METi или в сочетании с CDK4 / 6i не влияла на состояние активации RAS / ERK, PI3K / AKT, SRC и STAT3, на что указывают неизменные уровни активированного AKT (pAKT S473 ), ERK1 / 2 (pERK T202 / Y204 ), SRC (pSRC Y416 ) и STAT3 (pSTAT3 Y705 ), скорее всего, из-за активации этих путей посредством передачи сигналов независимо от MET. Напротив, явное снижение было замечено в модификациях, указывающих на активацию PTK2 (pPTK2 Y576 / 577 и pPTK2 Y925 ) и PTK2B (pPTK2B Y402 ), что свидетельствует о снижении передачи сигнала через эти киназы после ингибирования MET.В совокупности результаты идентифицируют активность семейства FAK как критически зависимую от MET в HCT116 и потерю активации семейства FAK как ключевого изменения в результате ингибирования MET / MST1R.

    Чтобы получить доказательства того, вовлечена ли активация семейства FAK посредством MET в активацию CDK4 / 6i-резистентной CDK2, мы генерировали клетки HCT116, экспрессирующие нацеленный на мембрану, конститутивно активный вариант PTK2, CD2-PTK2 (рис. 6a). Экспрессия CD2-PTK2 не влияла на способность ингибирования MET блокировать активность рецептора MET или на способность ингибирования CDK4 / 6 блокировать фосфорилирование RB1 (рис.6а). Однако экспрессия CD2-PTK2 обеспечивает устойчивую, устойчивую к METi активацию PTK2, на что указывает присутствие pY576 / 577-фосфорилированного CD2-PTK2 (фиг. 6a). Важно отметить, что в клетках, экспрессирующих CD2-PTK2, на активность CDK2 в иммунопреципитатах против CDK2 не влияло комбинированное ингибирование CDK4 / 6 и MET (фиг. 6b, c). Более того, повышенная ассоциация p21 CIP1 после комбинированного ингибирования CDK4 / 6 и MET отменяется (рис. 6b, d и дополнительный рис. 6c-f).

    Фиг.6

    Конститутивная активность PTK2 нарушает взаимодействие между MET и CDK4 / 6is. a - d Характеристика комплексов CDK2 в HCT116, экспрессирующих конститутивно активный CD2-PTK2. a Иммуноблот входного лизата, документирующий экспрессию CD2-PTK2 и модуляцию биомаркеров лекарственного ответа pRB1 S780 (для активности CDK4 / 6) и pMET Y1234 / 5 (для активности MET). C обозначает контрольные клетки без экспрессии CD2-PTK2, <идентифицирует сигнал для клеточного PTK2, * идентифицирует CD2-PTK2. b Репрезентативный анализ киназы иммунопреципитации. Изобилие фосфорилированного in vitro субстрата GST-pRB 763-928 (р-субстрат), отражающего активность CDK2 и общий субстрат (вверху), изобилие p21 , CIP1 и CDK2 (внизу) в соответствующих иммунопреципитациях. c Среднее количество p-субстрата и d среднее количество соосажденного p21 CIP1 по сравнению с клетками, обработанными носителем. Данные ( c , d ) представляют собой среднее значение ± диапазон для двух независимых повторов.Клетки обрабатывали в течение 24 ч, используя 500 нМ каждого ингибитора. * p ≤ 0,05, ** p ≤ 0,01, двусторонний ANOVA, оценивающий размер эффекта комбинированного лечения между контролем и клетками, экспрессирующими CD2-PTK2, и нс p > 0,05, двусторонний ANOVA-анализ размер эффекта одного агента по сравнению с размером эффекта их комбинации в клетках, экспрессирующих CD-PTK2. e - f Клоногенная выживаемость клеток, экспрессирующих конститутивно активный CD2-PTK2. e Примерные необработанные изображения и f количественная оценка, представляющая средние значения ± стандартное отклонение для трех независимых повторов. Клетки обрабатывали ингибиторами 500 нМ в течение 120 часов. * p ≤ 0,05, ** p ≤ 0,01, двусторонний дисперсионный анализ, оценивающий величину эффекта комбинированного лечения между контрольными и экспрессирующими CD2-PTK2 клетками. г Репрезентативные иммуноблоты, оценивающие количество белков семейства CIP / KIP и SKP2 в HCT116 с конститутивно активным CD2-PTK2.Клетки обрабатывали ингибиторами 500 нМ. ч ОТ / кПЦР для оценки уровней мРНК CDKN1A . Клетки обрабатывали ингибиторами 500 нМ в течение 24 часов. Данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение трех независимых повторов; **** p ≤ 0,0001, нс p > 0,05, односторонний дисперсионный анализ. GAPDH ( a , g ) служил в качестве контроля загрузки. (Относится к дополнительному рисунку 6)

    Примечательно, что экспрессия CD2-FAK снижает способность комбинированного ингибирования CDK4 / 6 и MET снижать образование колоний в клетках HCT116 (фиг.6д, е) независимо от статуса TP53. Он также уменьшал увеличение p21 CIP1 и потерю SKP2, связанную с комбинированным ингибированием MET и CDK4 / 6 (фиг. 6g и дополнительный фиг. 6g). В совокупности эти результаты показывают, что снижение активности FAK является ключом к ограничению CDK2 и клоногенной активности в результате комбинированного ингибирования MET и CDK4 / 6 в клетках.

    Обнаружение того, что комбинированное ингибирование оси MET / FAK и CDK4 / 6 может способствовать накоплению p21 CIP1 в HCT116 TP53 - / - , подразумевает механизм TP53 -независимого поколения p21 CIP1 , вызвано ингибированием оси MET / FAK.В соответствии с этим и независимо от статуса TP53, мы наблюдали значительное увеличение мРНК CDKN1A (кодирующей p21 CIP1 ) после комбинированного ингибирования CDK4 / 6 и MET по сравнению с контролем или клетками, обработанными CDK4 / 6i (рис. 6h), что отменяется экспрессией конститутивно активного PTK2. Примечательно, что уровень мРНК CDKN1A увеличился в клетках, обработанных одним только METi, что указывает на то, что транскрипция CDKN1A подавляется передачей сигналов через MET / FAK, независимо от CDK4 / 6.Вместе эти эксперименты идентифицируют активность семейства FAK как критический эффектор ниже MET, участвующий в сохранении активности CDK2 и клоногенного потенциала в клетках, подвергшихся действию CDK4 / 6i. Они также предполагают, что TP53-независимое накопление транскрипта CDKN1A является кандидатным механизмом, с помощью которого ингибирование MET / FAK способствует активации CDK4 / 6i-устойчивой CDK2 и активности клеточного цикла.

    SKP2 является критической общей мишенью, задействованной MET и CDK4 / 6

    Помимо увеличения p21 CIP1 , наши более ранние результаты показали потерю SKP2 после комбинированного ингибирования CDK4 / 6 и MET (рис.5e и дополнительный рис. 5). SKP2 опосредует деградацию p21 CIP1 [37] и сам нацелен на деградацию с участием RB1 [15, 16]. Следовательно, потеря SKP2 может быть следствием устойчивой активности RB1 вследствие эффективного контроля активности CDK2 через p21 CIP1 . Потеря SKP2 может стабилизировать p21 CIP1 , синтезированный из транскрипта, который накапливается в результате ингибирования оси MET / FAK.

    Чтобы проверить, объясняет ли эта модель, как взаимодействуют METis и CDK4 / 6, мы использовали миРНК или ингибиторы для удаления соответствующих компонентов и оценили влияние этого на потерю SKP2 и накопление p21 CIP1 (рис.7). В соответствии с моделью, удаление белков семейства RB устраняет потерю SKP2 и накопление p21 CIP1 после комбинированного ингибирования MET и CDK4 / 6 (фиг. 7a, с количественной оценкой на дополнительном фиг. 7a). Кроме того, в соответствии с этой моделью, абляция PTK2 или фармакологическое ингибирование активности семейства FAK с использованием дефактиниба было достаточным для запуска накопления p21 CIP1 , но недостаточным для того, чтобы вызвать потерю SKP2, для чего требовалось дополнительное ингибирование CDK4 / 6 (рис.7b, количественная оценка на дополнительном рис. 7b).

    Рис. 7

    SKP2 - критическая функция, выполняемая MET и CDK4 / 6. a - c Репрезентативные иммуноблоты для оценки уровней p21 CIP1 , p27 KIP1 и белка SKP2 в клетках, обработанных миРНК против белков семейства RB (RB) ( a ), siRNA против или PTK2 ингибитор FAK дефактиниб (900 нМ) ( b ) или миРНК, нацеленная на SKP2 ( c ).Показаны данные для TP53 WT и TP53 - / - HCT116, MCF7 и A549. Клетки обрабатывали 500 нМ METi кризотинибом и / или CDK4 / 6i палбоциклибом. GAPDH служил контролем загрузки. d ОТ / кПЦР, оценивающая мРНК CDKN1A в HCT116, обработанном 500 нМ ингибиторами в течение 24 часов. Данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение для трех независимых повторов; ** p ≤ 0,01, однофакторный дисперсионный анализ, сравнивающий эффект носителя по сравнению с лечением. и Модель, подробно описывающая последствия комбинированного ингибирования CDK4 / 6 и MET.Серый прямоугольник указывает на активный узел, а красный указывает на активную сигнализацию. (Относится к дополнительному рисунку 7)

    Неожиданно потеря SKP2 - согласно прогнозам, требует ингибирования МЕТ, чтобы вызвать повышенную регуляцию p21 CIP1 - привела к накоплению p21 CIP1 , которое не было дополнительно усилено ингибированием МЕТ (фиг. 7c, количественное определение на дополнительном рис. 7c). Этот результат указывает на то, что активация транскрипта p21 CIP1 , вызванная ингибированием MET, может не быть существенной для накопления p21 CIP1 , по крайней мере, в условиях, когда SKP2 отсутствует вначале, и может указывать на то, что ингибирование MET / FAK участвует в стимулировании SKP2. потеря, не зависящая от деградации SKP2, которую он может обеспечить, взаимодействуя с ингибированием CDK4 / 6 в направлении активации RB1.В соответствии с этим предсказанием мы обнаружили, что ингибирование MET, помимо увеличения уровней транскрипта для p21 CIP1 , подавляло уровни транскрипта для SKP2, которому, как и увеличению транскрипта p21 CIP1 , противодействовал конститутивно активный PTK2 (рис. 7d). ). Также в соответствии с этим предсказанием мы обнаружили, что потеря SKP2 позволяет palbociclib контролировать активацию CDK2 без дополнительного ингибирования MET (дополнительный рис.